Poly（I：C）影响间充质干细胞的成骨分化及其对树突状细胞的作用

目的：间充质干细胞（MSC）能够表达Toll样受体（TLR）,但TLR配体刺激对MSC的影响依然存在争议.本研究分析了TLR3配体刺激对脐带MSC表型、细胞增殖、凋亡、成骨分化和功能的影响.方法：用混合酶法分离培养了人脐带来源的MSC；用流式细胞仪分析了TLR3配体—Poly（I：C）刺激后MSC表面标志CD29、CD44、CD105、CD31、CDl17和CD45表达的变化；用CCK-8和Annexin-V/PI法分别检测了不同浓度Poly（I：C）刺激24及48小时后MSC的增殖和凋亡情况；进一步分析了Poly（I：C）对MSC成骨分化的影响.此外在Poly（I：C）和MSC存在时,流式检测了DC成熟表面标志CD40、CD86、MHCⅡ的表达,DC对右旋糖酐的吞噬,混合淋巴实验检测了DC的抗原递呈能力.结果：Poly（I：C）的刺激不影响MSC的表型和增殖；只有高浓度组的Poly（I：C）刺激引起MSC的凋亡；Poly（I：C）抑制成骨相关基因RUNX2、ALP和OC的表达,抑制MSC的成骨分化；Poly（I：C）存在的情况下,MSC下调DC成熟表面标志CD40、CD86和MHCⅡ的表达,增强DC对右旋糖酐的吞噬能力,并抑制DC对T的活化作用.结论：Poly（I：C）能够影响MSC的成骨分化及免疫调节功能,提示TLR3信号的活化可能在成骨分化中发挥作用.