微滴式数字PCR(ddPCR)快速检测α珠蛋白基因ααα anti-3.7 三联体

目的建立一种基于微滴式数字PCR（ddPCR）技术的α珠蛋白基因ααα anti-3.7 快速检测方法。 方法以β-actin为参比基因、α1基因X1/Y1盒之间的差异性序列为目的基因代表性扩增子，设计特异性引物和TaqMan探针，建立基于ddPCR技术的拷贝数定量方法；检测28例已知基因型和60例临床样本，评价此方法的灵敏度和准确性。 结果采用本研究建立的方法，28例已知基因型样本的检测结果均与靶基因型结果相符；60例临床样本中检出5例αα/ααα anti-3.7 ，与MLPA的验证结果一致；方法学评价结果显示此ddPCR体系的灵敏度与准确性均达100%。 结论建立了一种α珠蛋白基因ααα anti-3.7 三联体ddPCR检测方法，操作简单快速、结果准确可靠，可应用于人群筛查和临床常规分子诊断。