Improved Staining Method for Differentiating Immature Germ Cells from White Blood Cells in Human Seminal Fluid

2009 
Zusammenfassung Verbesserte Farbemethode zur Differenzierung unreifer Keimzellen von weisen Blutkorperchen in menschlicher Samenflussigkeit Es wird uber eine neue Farbemethode zur Differenzierung weiser Blutkorperchen von unreifen Keimzellen im Ejakulat berichtet. Die Methode besteht aus einer Kombination von Bryan's Spermafarbung, die speziell das Akrosom der Spermatozoen und der Spermatiden farbt, und der Leishman Blutfarbung, das Leukocyten auf die gleiche Art wie in Blutausstrichen anfarbt. Die Granula mit positiver Peroxydasereaktion im Zyto-plasma der polymorphkernigen Leukocyten sind duetlich erkennbar. Daher ist es moglich, polymorphkernige Leucocyten von nicht separierten Spermatiden zu unterscheiden, wenn sie sich in normalem Zytoplasma befinden. Die Farbung des Akrosoms erlaubt eine Differenzierung zwischen Spermatiden und Lymphozyten. Vorlaufige Ergebnisse, die bei einer Gruppe von Mannern aus unfruchtbarer Ehe angestellt wurden, zeigen, das die Zahl der Leukocyten pro 100 Spermatozoen signifikant mit dem Prozentsatz der unreifen unreifen Keimzellen im Samen korreliert. Zum Prozentsatz der normalen, ovalen Spermatozoen besteht eine negative Korrelation. Resumen Metodo de tincion mejorado para difenciar ceculas germinales inmaduras de leucocitos en fluido seminal humano Se estudia un nuevo metodo de tincion para diferenciar los leucocitos de las celulas inmaduras en el fluido seminal. Es una combinacion de la tincion de esperma de Bryan, que tine en especial la cabeza acrosomical del esperma y la espermatide, y del tinte de sangre de Leishman, que tine los leucocitos de la misma manera que en las extensiones de sangre. Los granulos peroxidasa positivos se ven claramente en el citoplasma de los leucocitos PMN. De este modo, es posible diferensiar leucocitos PMN de espermatides no-separados, cuando presentan un citoplasma comun. La tincion de la cabeza acrosomica permite la difeirenciacion entre espermatides y linfocitos. Los resultados preliminares, de un grupo de varones de matrimonios infertiles en los cuales se les practico este metodo tintorial, demostro que el recuento de leucocitos/ 100 de esperma esta directamente relacionado con el porcentaje de celulas germinales inmaduras en el liquido seminal, e inversamente relacionado con el porcentaje de espermatozoos normales.
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