Efeitos neurotóxicos causado por ferro no comportamento de Caenorhabditis elegans

INTRODUCAO: A neurodegeneracao e o componente principal do Mal de Parkinson e do Mal de Alzheimer, assim como de outras doencas nas quais os neuronios motores estao envolvidos. Varios estudos tem apontado o ferro como um elemento importante na patogenese dos mecanismos da neurodegeneracao. Os Caenorhabditis elegans sao pequenos vermes que vivem no solo, com um comprimento ate 1,2 mm na fase adulta. Entre as principais vantagens da utilizacao deste modelo salienta-se a sua facil manipulacao e manutencao em laboratorio. Este modelo tem-se mostrado extremamente eficaz, podendo ser um metodo alternativo de grande potencial para substituir outros modelos animais. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos neurotoxicos do ferro avaliando o comportamento dos C. elegans.METODOLOGIA: Os nematoides utilizados no estudo foram do tipo selvagem N2, obtidos do Caenorhabitis Genetics Center, Minnesota, EUA. As cepas foram mantidas em meio de crescimento de nematoides (NGM) )/E.coli OP50, sendo mantidos em incubadoras a 20oC. Os vermes no primeiro estagio larval (L1) foram expostos ao ferro (FeSO4) , obtidos por um processo de sincronizacao. As larvas (2500 por grupo) foram expostas a concentracoes de FeSO4 variando entre 1 µM ate 1mM por 30 minutos (exposicao aguda). Logo apos o periodo de exposicao, os vermes foram lavados em tampao M9 (KH2PO4 20mM; Na2HPO4 42mM; NaCl 86mM; MgSO4 1mM) e colocados sobre uma nova placa NGM/OP50. Apos 48h foi realizada a avaliacao do comportamento dos animais. Foram realizados tres experimentos em duplicatas. RESULTADOS E DISCUSSAO: Em condicoes normais, a locomocao dos C. elegans e resultante dos movimentos oscilatorios da cabeca durante o qual a ponta do nariz se move rapidamente de um lado para outro. Esta atividade e diminuida quando em animais expostos a uma dose de 1µM de FeSO4 . A resposta de fuga ao toque tambem fica diminuida nos animais expostos ao Fe, sendo que os controles param de responder ao estimulo, em media, apos o decimo toque, enquanto os expostos param de responder apos, em media, o sexto toque. Baseado na forca do estimulo o animal tem que decidir se engajar em uma resposta de fuga. Os dados preliminares do estudo demonstram correlacao entre as atividades motoras dos animais e tratados apresentam menor motilidade que e indicada pelo numero de movimento de cabeca e uma menor capacidade de resposta a estimulos nos animais tratados com FeSO4.CONCLUSOES: Os movimentos e respostas a estimulos quimicos e mecânicos em C. elegans estao diretamente ligados aos sistemas de neurotransmissores. Estes nematoides possuem 302 neuronios, entre eles neuronios dopaminergicos, que de acordo com diversos trabalhos sao afetados por concentracoes inadequadas de ferro, sendo assim estudos como este sao de grande importância pra o esclarecimento para o papel do ferro nas doencas neurodegenerativas como Alzheimer e Parkinson.