融合蛋白IFN—IgG Fc在乳酸乳杆菌中的表达及其生物学活性研究

用乳酸菌表达有药用价值的生物学活性多肽，是当前国际上的研究热点之一，对开发新的功能性食品具有广阔的前景。本文应用PCR方法将人干扰素IFN-α-2b基因与IgGFe基因连接，并引入一段柔性连接肽，构建了融合蛋白基因IFN-IgG Fc，将融合蛋白基因克隆到原核表达载体pSC111AE中，转化乳酸乳杆菌ATCC393进行诱导表达及鉴定，并研究了融合蛋白的生物学活性。结果表明，通过Western-Blot方法在表达上清液检测出干扰素融合蛋白，ELISA测定表明两段多肽能够保持各自的构象，基因工程乳酸菌表达的上清液可以诱导WISH细胞产生明显的抗VSV病毒的活性，其活性为1．71×10^3IU／ml。本文首次构建并在大肠杆菌和乳酸菌表达了IFN-IgG Fc融合蛋白，获得了能产生人干扰素的乳酸菌株，为基因工程乳酸菌及相关药物的开发研究奠定了基础。