Développement de vecteurs lentiviraux : application à la thérapie génique d'un modèle murin de protoporphyrie érythropoi͏̈étique

La transplantation de cellules souches hematopoietiques (CSH) genetiquement modifiees peut representer une alternative a l'allogreffe de moelle osseuse (MO) en cas d'absence de greffon HLA compatible. Dans cette these nous avons developpe des vecteurs de transfert de gene derives de lentivirus (VIH-1) et teste leur capacite a delivrer un gene therapeutique dans les CSH d'un modele murin de protoporphyrie erythropoietique (PPE). La PPE est une maladie genetique liee a un deficit en ferrochelatase (FECH), conduisant a l'accumulation toxique de protoporphyrine associee a une photosensibilite cutanee. Nous demontrons un transfert de gene efficace dans les CSH murines associe a la correction de la photosensibilite a long terme grâce a l'expression du gene FECH dans le compartiment erythroide de la MO. La coexpression du gene FECH et du gene MGMT (methylguanine ADN-methyltransferase) permet la correction metabolique et la selection in vivo des CSH transplantees en l'absence de myeloablation, conduisant a la correction phenotypique a long terme de la maladie.