بررسی اثرات عصاره گیاه زیرفون (Tilia plathyphyllos) بر بیان ژن کاسپازهای 3 و 9 در رده سلول سرطانی غدد پستانی سگ (CF41.Mg)

سرطان پستان در سگ و گربه بعد از تومورهای پوستی، شایع­ترین نوع سرطان می­باشد. هرگونه اختلال در روند آپوپتوز سبب ایجاد و رشد سلول­های سرطانی می­شود. کاسپازهای 3 و 9 به عنوان کاسپازهای اجرایی و القاگر نقش مهمی در فرآیند آپوپتوز دارند. این مطالعه به منظور بررسی اثر عصاره گیاه زیرفون بر بیان ژن کاسپاز­های 3 و 9 در رده سلول سرطانی غدد پستانی سگ انجام شد. سلول­های سرطانی غدد پستانی سگ (cf41.mg) در مجاورت دوزهای 5، 10، 25، 50 و100 میکرومولار از عصاره زیرفون در محیط کشت به مدت 24، 48 و 72 ساعت پاساژ داده شدند. جهت بررسی میزان سلول­های زنده پس از انجام پاساژ از روش MTT  (microculture tetrajolium test) استفاده شد. برای فهم مکانیسم­های درگیر در القای مرگ سلولی در زمان های مذکور،RNA  استخراج و CDNA  سنتزشده و میزان بیان ژن­ کاسپاز­های 3 و 9  با استفاده از پرایمرهای  مختص به آنها به روشreal time PCR   و RT-PCR مورد بررسی قرار گرفتند. فعالیت ضدسرطانی این عصاره پس از 48 ساعت و با دوز 25 میکرومولار بیشترین تاثیر را داشت. نتایج آزمونRT-PCR  حاکی از بیان ژن کاسپاز­های 3 و 9 در نمونه­های تیمارشده در زمان­های 24، 48 و 72 ساعت بود. همچنین میزان بیان ژن کاسپاز 3 در دوزهای 10 و 100 میکرومولار و بیان کاسپاز 9 در دوز10 میکرومولار بیشتر از بقیه بود. نتایج حاصل از این مطالعه تأیید­کننده اثر مهاری عصاره  گیاه زیرفون بر تکثیر رده سلول­های سرطانی غدد پستانی سگ (cf41.mg) می­باشد.