Light microscope observation of circulating human lymphocytes cultured in vitro

Os linfocitos sao celulas importantes do sistema imune e tem sido largamente utilizados em estudos morfologicos. Entretanto, a literatura sobre tecnicas de preparacao dessas celulas e escassa e antiga, especialmente para linfocitos cultivados in vitro. Portanto, o objetivo desse estudo foi relatar com detalhes as tecnicas de isolamento e microscopia de luz de linfocitos mantidos em cultura. Amostras de sangue foram obtidas por puncao venosa e centrifugadas em gradiente de densidade de Percoll, para separar os leucocitos. Os linfocitos foram mantidos em frascos de cultura de 25 cm3 a 37oC. Apos a cultura, as celulas foram fixadas e coradas de acordo com a metodologia utilizada para esfregacos sanguineos. Nossos resultados mostraram que nem todos os fixadores e corantes utilizados para esfregacos sanguineos sao uma boa escolha para linfocitos cultivados in vitro.