Biofuncionalização de scaffolds de PLDLA imobilizados com o peptídeo RGDfK cíclico e epítopo knuckle (73-92) da BMP-2

A biofuncionalizacao de scaffolds polimericos biorreabsorviveis atraves da imobilizacao quimica de peptideos bioativos, capazes de serem naturalmente reconhecidas pelo tecido osseo nativo e entao, estimularem a diferenciacao osteogenica de celulas tronco mesenquimais, e uma estrategia bastante promissora na area da engenharia tecidual ossea. No presente trabalho, a superficie de scaffolds de poli (L-co-D,L acido latico) PLDLA foram biofuncionalizadas com o peptideo ciclico RGDfK e peptideo derivado do epitopo knuckle da proteina BMP-2 (73-92) que estao envolvidos, principalmente, na adesao celular e regulacao da maturacao do tecido osseo. A imobilizacao dos peptideos foi obtida atraves da pre-ativacao da superficie do PLDLA usando o tratamento por plasma de oxigenio, seguido da imobilizacao covalente dos peptideos via reacao EDC/sulfo-NHS. Os resultados obtidos pela tecnica de espectroscopia de fotoeletrons excitados por raios-X (XPS) e espectroscopia de reflectância total atenuada (FTIR-ATR) confirmaram a imobilizacao dos peptideos que estabelecem eficiencia de ligacao na proporcao de 1:2, com predominância do peptideo BMP-2 sobre o cRGD, tambem confirmada por microscopia confocal a laser (MCL). O tratamento por plasma de oxigenio na condicao de potencia de 100W resultou na expressiva diminuicao da massa molar que e indicativa de degradacao, contudo, a propriedade mecânica dos scaffolds nao foi afetada. A avaliacao biologica dos scaffolds biofuncionalizados com os peptideos cRGDfK, BMP-2 e cRGDfK/BMP-2 demonstrou que a associacao dos peptideos exerce efeito sinergico sobre a adesao e diferenciacao osteogenica de celulas-tronco mesenquimais de medula ossea de ratos Wistar, que foi confirmada pelo maior nivel de fosfatase alcalina e producao de colageno encontrados apos 7 dias de cultura. Estes resultados sao indicativos de que o metodo de modificacao de superficie utilizado no presente estudo pode ser usado no desenvolvimento de arcaboucos bioativos e biomimeticos com potencial aplicacao na engenharia tecidual ossea e medicina regenerativa. Abstract