Identificación de terneras Holando portadoras de BLAD y Citrulinemia en la región Este de Uruguay por PCR-RFLP y secuenciación

espanolLa deficiencia en la adhesion leucocitaria bovina (BLAD) y en la enzima arginosuccinato sintetasa (Citrulinemia) son enfermedades de herencia autosomica recesiva que han sido descritas a nivel mundial en la raza Holando. El objetivo de este estudio fue optimizar e implementar una metodologia de genotipado para la identificacion de animales portadores de los alelos causantes de estas enfermedades en una poblacion cohorte de terneras de recria de la raza Holando de la cuenca lechera de Cerro Largo. Las muestras de ADN de 190 terneras Holando fueron extraidas a partir de sangre fresca, siguiendo normas y protocolos del Banco de ADN de la Unidad de Biotecnologia INIA Las Brujas. El genotipado fue realizado mediante analisis PCR-RFLP con las enzimas de restriccion TaqI para BLAD y Eco47I (AvaII) para Citrulinemia. La confirmacion del genotipado fue evaluada mediante secuenciacion de los productos amplificados de ambas enfermedades. Se detecto la presencia del alelo mutante para BLAD en una sola ternera de recria y no se encontro portadoras de Citrulinemia en la poblacion analizada. Este trabajo represento el primer relevamiento de la prevalencia genica de las enfermedades BLAD y Citrulinemia en la region Este del Uruguay. EnglishDeficiency in bovine leukocyte adhesion (BLAD) and arginosuccinate synthase enzyme (Citrullinemia) are autosomal recessive diseases that have been described worldwide in the Holstein breed. The objective of this study was to optimize and implement a methodology of genotyping for the identification of animals carrying the allele causing these diseases in a population cohort of calves Holstein of dairy farm in Uruguay basin. DNA samples from 190 Holstein calves were extracted from fresh blood following rules and protocols DNA Bank Unit Biotechnology INIA Las Brujas. Genotyping was performed by PCR-RFLP analysis with restriction enzymes TaqI for BLAD and Eco47I (AvaII) for Citrullinemia. Results of RFLP genotyping were confirmed by sequencing of the amplified products of both diseases. The presence of the BLAD mutant allele was detected in only one calf while no Citrullinemia carriers were found in the analyzed population. This study represented the first survey of the prevalence of BLAD and Citrullinemia diseases of dairy cattle in the eastern region of Uruguay.