Analyse fonctionnelle et dynamique des corps de Negri, l'usine virale induite par le virus de la rage

La replication et l'assemblage de nombreux virus ont lieu dans des compartiments specialises appeles usines virales. Le virus de la rage induit la formation d'inclusions cytoplasmiques, les corps de Negri (CN). Les CN sont composes des proteines N, P et L ainsi que de proteines cellulaires et des ARN viraux, ils sont le lieu de la replication et de la transcription virale. Aux temps precoces, il y a un nombre limite de CN qui grandissent au cours de l'infection, ensuite leur nombre augmente et des petites inclusions sont detectees. Afin d'analyser la dynamique des CN, nous avons realise de la video-microscopie en utilisant un virus fluorescent. Nous avons mis en evidence des fusions de CN qui peuvent expliquer l'augmentation de leur taille. Des structures dynamiques, inferieures a 200 nm, sont ejectees des CN. Elles correspondent a des nucleocapsides (NC) neo-synthetisees. Leur mouvement est microtubules dependant. Les CN seraient impliques dans la morphogenese de NC qui peuvent atteindre la membrane plasmique et former des particules virales ou participer a la genese d'usines virales tardives. Parallelement nous avons montre que le virus de la rage induit la formation de granules de stress (GS) connectes aux CN. Les GS sont localises a proximite et a l'interieur des CN. Le marquage des ARN viraux et des experiences de FISH indiquent que les ARNm se localisent dans les GS. La depletion de PKR inhibe la formation des GS et favorise la multiplication virale. De meme, la depletion de TIA-1 augmente la replication virale. Cependant, la formation des GS ne requiert pas TIA-1, dans un contexte infectieux ou non, contrairement a ce qui est decrit dans la litterature.