Caracterización del patrón de expresión de la familia de proteínas Wnt en la lesión medular

Existen diferentes trastornos que pueden danar el sistema nervioso central (SNC) y que, desafortunadamente, pueden dar lugar a una perdida permanente de la funcion motora, sensitiva y autonomica, debido a la limitada capacidad del SNC para regenerar los axones danados y reemplazar las neuronas afectadas. En la presente Tesis Doctoral nos centramos en la lesion medular (LM) traumatica, que es una patologia devastadora con secuelas funcionales permanentes que supone un importante impacto social y economico. Actualmente, no existe una terapia efectiva y universalmente aceptada para el tratamiento de la LM. Por este motivo, resulta esencial estudiar y comprender los mecanismos de actuacion de los factores que gobiernan este complicado escenario biologico. En este sentido, la familia de proteinas Wnt constituiria una excelente candidata, que podria conducir al desarrollo de posibles terapias. Esta familia de proteinas participa en la regulacion de numerosos aspectos del desarrollo neural y desempenan un papel indispensable en la homeostasis de los tejidos, la renovacion celular y la regeneracion en el individuo adulto. Basandonos en evidencias previas en cuanto a la presencia y participacion de esta familia de proteinas en diferentes alteraciones del SNC adulto, hemos analizado el patron de expresion de ARNm de los diferentes ligandos Wnt conocidos, mediadores intracelulares e inhibidores solubles en la medula espinal de ratas adultas sin lesion, asi como su modulacion a lo largo del tiempo tras la induccion de una LM de tipo contusivo. Nuestros resultados muestran que todas estas moleculas son expresadas fisiologicamente, y que la LM induce un cambio drastico y dependiente del tiempo en el patron de expresion de ARNm para la mayoria de ellas. Ademas, hemos evaluado la activacion de la via de senalizacion canonica de Wnt en la medula de las ratas no lesionadas, y hemos comprobado que se encuentra activa en condiciones fisiologicas a traves de la deteccion de las formas activas de LRP6 y beta-catenina en la medula intacta. Tras la LM se produce una activacion de la via canonica, como podemos deducir del incremento de la forma fosforilada de Dvl-3 y de la deteccion de las formas activas de LRP6 y beta-catenina en celulas localizadas rodeando el epicentro de la lesion. A continuacion, analizamos el patron de expresion de ARNm y proteina para los diferentes receptores Fz conocidos, determinando especificamente que tipos celulares expresan el receptor Fz5, en la medula espinal de ratas adultas sin lesion, asi como su modulacion tras la induccion de una LM de tipo contusivo. Nuevamente, hemos detectado la expresion del ARNm de la mayoria de los receptores en la medula no lesionada, asi como variaciones a lo largo del tiempo en los niveles de expresion tras la LM. Tambien observamos que la expresion espacio-temporal de los receptores a nivel proteico se ve alterada debido a la progresion de la LM. Por ultimo, determinamos el patron de expresion de ARNm de los ligandos Wnt, receptores Fz, co-receptores, mediadores intracelulares e inhibidores solubles en la medula espinal de ratones adultos no lesionados, asi como su modulacion a lo largo del tiempo tras la induccion de una LM de tipo lacerante, y examinamos especificamente que tipos celulares expresan los receptores Fz1 y Fz4 en la medula espinal de ratones con y sin lesion. En resumen, nuestros resultados sugieren una implicacion de esta familia de proteinas en la regulacion de numerosos procesos biologicos tanto en condiciones fisiologicas como en el contexto de la LM, y suponen la base para futuros experimentos que permitan dilucidar las funciones especificas que estas proteinas pueden estar desempenando, y de esta forma poder generar el conocimiento esencial que sustente el desarrollo de posibles tratamientos para la LM, asi como para otras neuropatologias con mecanismos subyacentes compartidos.