mmu-miR-294调控MMP3靶基因对LLC细胞侵袭迁移的影响

目的预测并验证小鼠mmu。miR．294调控的靶基因，探讨其在肺癌发生发展中的生物学功能。方法生物信息学预测mmu—miR-294可能调控的靶基因金属蛋白酶（MMP3），双荧光素酶检测验证mmu—miR-294调控MMP3的真实性；脂质体2000介导转染mmu—miR-294模拟物进入Lewis（LLC）细胞株，通过Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变。结果重组质粒经XbaI单酶切能获得约5000bp和100bp的酶切片段，阳性克隆测序，双荧光素酶报告基因检测证明合成寡核苷酸链序列插入正确；脂质体2000介导转染mmu—miR-294模拟物，过表达实验组MMP3蛋白水平较对照组明显降低。转染mmu—miR-294模拟物后LLC细胞的侵袭迁移能力显著降低（P〈0．01）。结论低表达mmu—miR-294有助于维持LLC的侵袭转移特性，增加其表达水平可以有效抑制LLC的侵袭迁移能力。mmu—miR-294可能通过调控其靶基因MMP3表达而发挥功能。