Señal de calcio y oxidantes en la apoptosis de células leucémicas HL-60

espanolLa apoptosis es un proceso fisiologico altamente regulado que esta asociada con elevaciones en la [Ca2+]i y la produccion de especies reactivas de oxigeno, lo que genera un colapso mitocondrial y liberacion de factores mitocondriales propapoptoticos, que originan finalmente muerte celular. El factor de necrosis tumoral, TNF? es un miembro de un grupo de citoquinas que estimulan la reaccion de fase aguda. El papel primario del TNF esta en la regulacion de celulas inmunes. El TNF es capaz de inducir muerte celular apoptotica e inflamacion. La desregulacion de la produccion de TNF se ha relacionado con una amplia variedad de enfermedades humanas, asi como cancer. El receptor TNF-R1 esta involucrado en senalizacion de muerte. TRADD une FADD, el cual recluta a la cistein-proteasa denominada caspasa-8. Una alta concentracion de caspasa-8 induce su activacion proteolitica seguida del corte y liberacion de las caspasas efectoras, lo cual conduce a apoptosis celular. Este seria un ejemplo de los procesos denominados como via extrinseca de la apoptosis. Por todo esto, nuestro objetivo es profundizar en el esclarecimiento de los mecanismos intracelulares implicados en la apoptosis inducida con el TNF, intentando analizar la participacion de la mitocondria como organulo generador de agentes oxidantes. Asi mismo trataremos de analizar la relacion entre la senal de Ca2+ y los agentes oxidantes, y la posible participacion de la produccion endogena de EROs en la apoptosis inducida por TNF?. Para ello, utilizaremos las lineas HL-60 y las compararemos con las K-562 y las U937. EnglishApoptosis is a physiological process highly regulated which is associated with [Ca2+]I increase and ROS production, producing mitochondrial collapse and the release of pro-apoptotic mitochondrial factors, which eventually produce cell death. Tumor necrosis factor, TNF?, is a member of a group of cytokines that stimulate the acute phase reaction. The primary role of TNF is in the regulation of immune cells. TNF is able to induce apoptotic cell death and inflammation. Dysregulation of TNF production has been implicated in a variety of human diseases, as well as cancer. TNF-R1 is involved in death signaling. TRADD binds FADD, which then recruits the cysteine protease caspase-8. A high concentration of caspase-8 induces its autoproteolytic activation and subsequent cleaving of effector caspases, leading to cell apoptosis. This would be an example of processes called as extrinsic pathway of apoptosis. Taken together, our objective is elucidating intracellular mechanisms involved in TNF-induced apoptosis, trying to analyse the contribution of mitochondria as ROS seed. Additionally, we will try to analyse the relationship between Ca2+ signaling and ROS, and the implication of endogenous production of ROS in TNF?-induced apoptosis. For this, we will use the HL-60 cell line, and we will compare them with K-562 and U937.