感染沙漠玫瑰的緬梔嵌紋病毒（Plumeria mosaic virus）之鑑定與檢測

2013年高雄「大紅花」沙漠玫瑰，疑似病毒感染，經單斑接種於奎藜（Chenopodium quinoa Willd.），分離得到一個病毒純系的分離株DR-TW。經免疫分析顯示此分離株與雞蛋花嵌紋病毒（Frangipani mosaic virus; FrMV）及番茄嵌紋病毒 （Tomato mosaic virus; ToMV）等菸草嵌紋病毒屬（Tobamovirus）的病毒抗體有交互反應。汁液接種番杏、紅藜（Chenopodium amaranticolor Coste et Reyn）、奎藜、綠藜（Chenopodium murale L.）、千日紅（Gomphrena globosa L.）及曼陀羅後都呈局部病斑，菸草、雞蛋花及沙漠玫瑰植株則形成系統性嵌紋，但對辣椒、番茄等茄科植物的病原性及致病力均弱於ToMV。以菸草嵌紋病毒屬廣效性引子對TobRT up1/TobRT do2進行反轉錄－聚合酶連鎖反應（reverse transcription-polymerase chain reaction; RT-PCR），增幅出568bp的核酸片段。經定序後與GenBank中的核苷酸序列進行比對，結果顯示沙漠玫瑰台灣分離株（DR-TW）與緬梔嵌紋病毒（Plumeria mosaic virus; PluMV）的相同度高達98%。進行DR-TW基因體定序，得核苷酸全長6,683 bp（GenBank accession number KX881422），共轉錄出188.3 kDa及130.4 kDa的複製酶、28.7 kDa的移動蛋白及19.0 kDa的鞘蛋白。設計PluMV專一性引子對（PLuMVcp-up/PLuMVcp-dw），經RT-PCR可增幅出PluMV的核酸片段643 bp，其他8個供試菸草嵌紋病毒屬病毒則無。配合FrMV專一性引子對FrMVcp-up/FrMVcp-dw，以RT-PCR即可鑑別FrMV及PluMV。