IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DE BACTÉRIAS LÁCTICAS COM POTENCIAL PROBIÓTICO PRESENTES EM QUEIJO MINAS PADRÃO ARTESANAL

2015 
Probioticos sao micro-organismos vivos contidos em suplementos alimentares, capazes de produzirem efeitos beneficos no hospedeiro, favorecendo o equilibrio e o incremento da microbiota nativa. Para maior seguranca de um produto probiotico e de insuma importância a correta e segura identificacao dos isolados, o que nem sempre e possivel por testes bioquimicos ou fenotipicos, sendo necessario, entao, a identificacao molecular. Assim, o presente trabalho tem como intuito a identificacao molecular de dez bacterias laticas com potencial probiotico isoladas de Queijo Minas Padrao artesanal adquiridos no municipio de DivinopolisMG. Os isolados foram submetidos a metodologia de PCR usando primers especificos a regiao do gene rDNA 16S: 27F (5' AGATTTGATCCTGGCTCAG 3') e 1492R (5’ GGTTACCTTGTTACGACTT 3’). A PCR foi realizada por 3 minutos a 94oC; seguido por 30 ciclos de 1 minuto a 94oC,1 minuto a 55oC e 2 minutos a 72oC e, posteriormente 8 minutos a 72oC. Para as reacoes foram utilizados 50ng de DNA, 1mM de dNTP, 0,36μM de cada primer, 2,5 U de Taq DNA polimerase,tampao da enzima 1X e 50mM de MgCl2. O material foi submetido ao sequenciamento e as sequencias comparadas em bancos de dados. A analise possibilitou a identificacao de quatro bacterias lacticas: Leuconostoc mesenteroides, Weissella paramesenteroides, Lactobacillus plantarum e Lactobacillus paraplantarum. A partir desta identificacao,estudos para confirmar o potencial probiotico das linhagens serao conduzidos, para futuramente ser possivel utiliza-las em alimentos probioticos.
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