Yeast and the control of RAS by exchange factors

La levure contient deux genes RAS qui sont isofonctionnels. Leurs cibles d'action different chez la levure et chez les mammiferes mais ils possedent des elements regulateurs conserves, ce qui a permis l'identification des facteurs d'echange activateurs de ras chez les mammiferes. Les proteines ras transmettent des signaux metaboliques chez la levure et stimulent l'adenylate cyclase. L'activation de ras est sous le controle de Cdc25p, une proteine qui stimule l'echange GDP/GTP sur ras. Chez la levure, il existe un second gene, SDC25, qui code pour un homologue de Cdc25p mais la regulation de son expression est telle que seul CDC25 apparait essentiel. Les proteines de ces deux genes sont fortement liees aux membranes et possedent en commun un domaine SH3 dans leur partie N-terminale. Nous avons montre que l'instabilite de Cdc25p est due a des regions de degradation semblables a celles des cyclines B. La regulation de l'expression de ces facteurs d'echange pourrait etre un moyen de regulation utilise par la levure. Parmi les homologues de ces facteurs d'echange decouverts recemment chez les mammiferes, nous nous sommes interesses au produit du gene HGRF humain dont le cDNA exprime chez la levure supprime le defaut de Cdc25p. Nous avons entrepris une analyse par mutagenese dirigee qui a permis de mettre en evidence des positions impliquees dans l'interaction avec ras.