Caracterisation et analyse de la mutagenese du gene suppresseur de tumeur p53 chez le flet, platichthys flesus (l. )

Une etude epidemiologique preliminaire realisee en estuaire et baie de seine a revele que 1,4% des flets adultes presentent des adenomes hepatiques et 3,7% des lesions potentiellement pretumorales. Dans le but de realiser ulterieurement des etudes d'epidemiologie moleculaire du cancer, le gene suppresseur de tumeur p53 a ete isole chez le flet par criblage d'une banque d'adnc. Ce gene code pour une proteine de 366 acides amines qui presente les principales caracteristiques d'une proteine p53, mais dont les extremites amino et carboxy-terminales ont nettement divergees au cours de l'evolution. La structure secondaire et les acides amines qui exercent un role cle dans l'activite transcriptionnelle, la fixation specifique a l'adn et l'oligomerisation sont conserves au niveau de la proteine de flet. Un anticorps polyclonal dirige contre une proteine p53 recombinante de flet a ete produit afin d'etudier les fonctions de cette proteine et son expression au cours du processus de tumorigenese. Cet anticorps reconnait la p53 de flet et celle de xenope en western blot mais pas la proteine humaine. Les mutations du gene p53 ont ete analysees dans 17 adenomes et lesions preneoplasiques hepatiques collectees en baie de seine, en mer du nord et en mer baltique. L'adn extrait a ete amplifie par pcr puis sequence. Une mutation au niveau de deux foyers basophiles ainsi que 15 polymorphismes ont ete identifies. Cette mutation entraine une substitution d'une valine par un acide glutamique au niveau du codon 147. Le residu correspondant dans la p53 humaine est implique dans la surface de contact a l'adn. Ces resultats suggerent (i) que les proprietes de la proteine p53 pourraient etre conservees au cours de l'evolution et (ii) que le gene p53 pourrait etre inactive par mutation ponctuelle au cours du processus de cancerogenese hepatique chez le flet.