Caractérisation et expression de proto-oncogènes "Myb-like" chez les unicellulaires ciliés

Dans cette these, deux genes de la famille myb ont ete clones et caracterises chez deux protistes cilies, Euplotes et Sterkiella (autrefois nomme Oxylricha). Le gene d'Euplotes est appele emyb1 et celui de Sierkiella, omyb1. Les genes myb sont tres largement repandus chez les animaux et les plantes. Ils ont tout d'abord ete identifies chez les vertebres comme des proto-oncogenes. Ils codent pour des proteines Myb qui sont des facteurs de transcription qui regulent la proliferation et differenciation cellulaires. Chez les plantes, les proteines Myb interviennent dans des activites cellulaires variees, comme le metabolisme cellulaire, la morphogenese, la formation des tissus et la proliferation et differenciation cellulaires. Le trait le plus caracteristique des proteines Myb est qu'elles presentent un domaine de liaison a l'ADN constitue de plusieurs repetitions d'environ 50 acides amines appelees motifs myb. Le nombre de repetitions est de trois chez les animaux. Chez les plantes, ce nombre est soit de deux (la grande majorite) ou de trois egalement (une minorite). L'etude des deux genes de cilies a revele que, dans ce groupe, existent des genes a deux repetitions (type R2) et des genes a trois repetitions (type R3). Le gene emyb1 ne contient que deux motifs alors que omyb1 en presente trois. L'analyse phylogenetique a montre que les deux genes myb de cilies appartiennent clairement a la meme famille que ceux des plantes et des metazoaires. Le niveau d'expression de emyb1 varie entre cellules matures (aptes a la conjugaison) et cellules immatures. Les resultats suggerent que ce gene pourrait intervenir dans la regulation du cycle cellulaire et dans la maturation cellulaire. D'autres etudes menees avec des oligonucleotides antisens suggeraient egalement un role possible dans le developpement du macronoyau dans les cellules exconjugantes. Chez Sterkiella, l'expression de omyb1 est augmentee chez les cellules soumises au jeune. Cette reaction au stress, pourrait etre a l'origine du declenchement du processus d'enkystement, en reaction aux conditions defavorables pour la cellule. Un autre gene implique dans le mecanisme de la transcription est le gene rpb9, qui a ete identifie sur le meme mini-chromosome que omyb1. Il est possible que chez les cilies hypotriches, cette situation ne soit pas sans signification biologique. La coexistence de ces deux genes sur un meme minichromosome faciliterait la regulation d'une transcription concertee en vue d'optimiser leur activite. Les cilies constituent un phyllum d'unicellulaires qui se distinguent des autres protistes par, entre autre, leur dimorphisme nucleaire. . .