靶向干扰Chkl增强阿霉素抗人乳腺癌MCF-7／adr细胞的作用机制研究

Chkl的高表达可能是肿瘤对化疗药物的敏感性降低的重要因素之一，本研究的目的是观察siRNA干扰Chkl对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7／adr（耐阿霉素）生长及细胞周期的影响，探讨Chkl在乳腺癌细胞耐药中的作用机制。采用RNAi技术抑制MCF-7／adr细胞中Chkl的表达。West-ern blot检测转染前后细胞内Chkl蛋白表达情况，经阿霉素作用后，流式细胞术（FCM）检测其细胞周期分布及细胞凋亡率，MTT法检测细胞增殖。Western blot结果显示，ChklsiRNA转染24h后，MCF-7／adr细胞中Chkl蛋白表达下降了67％，明显低于对照组和空载体转染组（ρ〈0．05）。FCM法检测结果显示，同时，抑制Chkl的表达可解除阿霉素引起的G2／M期阻滞；使阿霉素诱导的细胞凋亡率由转染前的（5．54±0．15）％上升到（22．24±0．13）％（ρ〈0.05）；在阿霉素浓度为0．4mg／L、4mg／L时，细胞的增殖活性分别下降13％、34％。提示siRNA干扰Chkl能够通过调控MCF一7／adr细胞周期及增殖从而增强乳腺癌细胞对阿霉素的敏感性，为临床上克服乳腺癌化疗耐药提供了新的作用靶点。