水产品中荧光假单胞菌( Pseudomonas fluorescens )RT-LAMP可视化检测方法的建立及应用

荧光假单胞菌（ Pseudomonas fluorescens ）在低温储存的水产品中仍能存活并繁殖，是导致水产品品质下降和恶化的主要原因。因此开发一种快速高效的检测手段显得尤为迫切。本文将逆转录-环介导等温扩增（Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification，RT-LAMP）技术与可视化检测手段结合，通过条件优化，确定了最佳反应温度（63℃），反应时间（60 min）和最适的Mg 2+ （2.5 mmol/L）添加量，建立了快速、高效、灵敏的RT-LAMP检测方法。灵敏度检测表明：本方法最低检出限为5.4 copies/反应，比PCR检测方法高200倍。该方法结合SYBR-Green I染色，通过目测就可以直接鉴别荧光假单胞菌，使得检测结果更加直观，简便可行。