Validação de método qualitativo para detecção de soja Roundup Ready® em grãos de soja por Nested PCR (reação em cadeia da polimerase)

Diante da expansao da soja geneticamente modificada e tendo como principio o direito basico do consumidor de acesso a informacao sobre as caracteristicas dos produtos ofertados, a legislacao brasileira e de outros paises estabelece um limite de organismos geneticamente modificados para indicacao de transgenia na rotulagem de alimentos. Provas laboratoriais qualitativas, baseadas na reacao em cadeia dapolimerase (PCR), tem sido recomendadas - como a Nested PCR. Contudo, a validacao dos metodos qualitativos, fundamental para a comprovacao da confiabilidade de resultados analiticos, representa ainda um importante ponto critico na gestao da qualidade de laboratorios de analises de alimentos. O objetivo do presente projeto foi a validacao intralaboratorial de um metodo qualitativo para deteccao de soja Roundup Ready® (RR®) em graos de soja por Nested PCR. Amostras de soja contendo de 0,001 a 1 % de RR®, mais o branco, foram analisadas. Tecnicas de quantificacao de acido desoxirribonucleico (DNA), eletroforese em gel de agarose e fluorimetria, foram comparadas. A taxa de falsopositivos foi nula, com 100,0 % de taxas de seletividade e confiabilidade, para as duas formas de quantificacao, demonstrando seletividade do metodo. Taxas desensibilidade e confiabilidade variaram entre 23,3 e 100,0 % (gel de agarose) e entre 30,0 e 100,0 % (fluorimetria). Foram obtidos 100,0 % de resultados positivos para todos os niveis acima de 0,030 %, indicando sensibilidade. Os limites de deteccao estimados para as tecnicas de eletroforese em gel de agarose e fluorimetria foram de 0,007 e 0,005 %, respectivamente. O metodo foi seletivo em relacao aos eventos de milho Bt11 e GA21 e robusto para diferentes concentracoes de DNA alvo e marcas de Taq DNA polimerase. A analise de amostras comerciais coletadas pela Vigilância Sanitaria do Estado de Minas Gerais permitiu demonstrar a aplicabilidade do metodo. O metodo foi adequado para o proposito de uso, considerando-se os limites maximos preconizados para organismos geneticamente modificados na legislacao nacional e internacional.