口虾蛄卵黄蛋白原（Vg）基因的初步研究

为研究口虾蛄Oratosquilla oratoria卵黄蛋白原（vitellogenin，Vg）基因，利用cDNA末端陕速扩增（RACE）技术克隆口虾蛄坛基因cDNA全长序列（GenBank登陆号：KR422400），并应用相对实时荧光定量PCR技术检测雌雄口虾蛄不同组织、不同发育时期卵巢瞻mRNA的表达量。结果表明：口虾蛄增基因全长7727bp，其中5’端非编码区为36bp，开放阅读框（ORF）为7521bp，3’端非编码区为170bp，共编码2506个氨基酸：预测的氨基酸序列中存在1个长度为20个氨基酸的信号肽，1个类似于枯草蛋白酶的内切蛋白酶识别位点（RSKR），3个潜在的N-连接糖基化位点，1个在无脊椎和脊椎动物卵黄蛋白原中都比较保守的KALGNVG基序；对其结构域分析表明，口虾蛄Vg蛋白含有4种保守结构域，分别为卵黄蛋白原N端结构域（Vitellogenin_N）、血管性血友病因子（vWFD）和两种未知功能结构域（domainofun-known function）DUFl943与DUFl081；经NCBIBLASTP同源性比较，口虾蛄Vg氨基酸序列与其他甲壳类的相似性为46％～52％；系统发育分析结果显示，口虾蛄Vg单独聚为一支；实时定量PCR结果显示，15虾蛄瞻基因在性腺和肝胰腺中均有表达，在肌肉中均不表达，卵巢中增mRNA的表达量显著高于其他组织（P〈0．05），且15虾蛄坛mRNA的相对表达量随着卵巢的发育不断增加（P〈0．05），在成熟期时达到最高值，随后显著下降，坛mRNA表达量在卵巢中的变化规律可以作为了解15虾蛄性腺发育的有效指标。本研究结果为口虾蛄Vg蛋白的功能研究奠定了基础。