反复冻融对枯草芽孢杆菌St-zn-34抑制链格孢菌活性的影响

目的以从冬枣分离的内生枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis St-zn-34）为供试菌株，明确反复冻融对菌体形态及其发酵滤液抑制枣缩果病初侵染病菌（ Alternaria alternata ）活性的变化。 方法对供试菌株分批发酵后进行反复冻融，采用梯度稀释计数法、滤纸片法分别测定活菌数量和芽孢含量、发酵滤液抑菌活性，对供试菌株的形态变化进行电镜观察。 结果发酵培养中pH值、活菌量、芽孢量及抑菌活性随发酵时间的增加均呈先上升后下降的趋势，其中发酵60 h发酵滤液抑菌活性最大，对此时的发酵液反复冻融，冻融3次枯草芽孢杆菌活菌量和发酵滤液抑菌活性依次减少，以后再冻融差异不显著（ P >0.05），电镜观察发现随冻融次数增加，菌体变小，表面凹陷、扭曲，胶状物流出。抑菌谱检测发现发酵滤液对12种植物病原菌具有抑菌能力。不同温度和蛋白酶处理发酵滤液表明，低于60℃以下，抑菌活性与对照相比差异不显著；80℃以上抑菌活性随温度上升而下降，与对照相比差异显著；蛋白酶K可降低抑菌活性。 结论反复冻融影响细菌形态并降低发酵滤液的抑菌活性。