血浆L-瓜氨酸和L-精氨酸浓度分析方法建立及应用

目的建立反相高效液相色谱（RP—HPLC）-紫外检测法同时测定血浆卜瓜氨酸和L，精氨酸浓度的方法并应用于临床。方法采用三氯乙酸结合加热法除血浆蛋白，用异硫氰酸苯酯（PITC）进行柱前衍生化反应，梯度洗脱，柱温46℃，波长254nm，进样20μl，流速1．0ml／min；通过分析21例消化道晚期恶性肿瘤病人、21例非恶性肿瘤病人和39例健康人的空腹血浆L-瓜氨酸和L-精氨酸浓度，验证方法的可行性。结果两种氨基酸的峰面积和浓度之间呈线性关系，线性范围从0～1000μmol／L，两者r=0．99995。L-瓜氨酸和L-精氨酸的定量下限分别为0．240μmol／L和0．448μmol／L。日内和日间变异系数（CVS）分别小于3．4％和7．2％，平均回收率在95．2％～104．1％。血浆L-瓜氨酸／L-精氨酸的比值均值，消化系统肿瘤病人组高于年龄性别相匹配的健康对照组，差异有统计学意义（t检验，P=0．009）；两种氨基酸比值诊断消化系统恶性肿瘤的敏感度和特异度分别为81％和71．4％。结论这一新方法可用于临床测定血浆L-瓜氨酸／和L-精氨酸浓度；与浓度相比，血浆两种氨基酸浓度比值也许是评估消化系统恶性肿瘤更加敏感的指标。