他莫昔芬对乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力、MMP-9活性和表达的影响及机制

目的 观察他莫昔芬（TAM）对乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力、基质金属蛋白酶9（MMP-9）活性、MMP-9蛋白表达、MMP-9 mRNA表达的影响,并探讨抑制G蛋白偶联受体30（GPR30）对上述作用的影响。方法 取对数生长期乳腺癌MCF-7细胞,用无血清无酚红高糖DMEM培养基培养24 h耗竭内源性雌激素。将MCF-7细胞接种6孔板,待细胞贴壁后分为对照组、TAM组和TAM＋G15（GPR30选择性抑制剂）组。对照组用无血清无酚红高糖DMEM培养基继续培养24 h。TAM组用含1μmol/L TAM的无血清无酚红高糖DMEM培养基培养24 h,TAM＋G15组先用含1μmol/L的G15的无血清无酚红高糖DMEM培养基培养30 min,然后用含1μmol/L TAM的无血清无酚红高糖DMEM培养基培养24 h。收集各组细胞,用Transwell侵袭实验检测MCF-7细胞侵袭能力,用明胶酶谱法检测MCF-7细胞培养液上清MMP-9活性,用Western blot法检测MCF-7细胞MMP-9蛋白表达,用实时荧光定量PCR法检测MCF-7细胞MMP-9 mRNA表达。结果 与对照组相比,TAM组MCF-7细胞侵袭能力升高,MMP-9蛋白和mRNA表达增加,培养液上清MMP-9活性升高（P均〈0.05）。与TAM组相比,TAM＋G15组上述指标均降低（P均〈0.05）。结论 TAM可增强乳腺癌MCF-7细胞的侵袭能力,上调MMP-9的活性及表达水平。用GPR30选择性抑制剂G15抑制GR30通路可以抑制这一作用。