An Economical Method for Primary Culture of Chicken Hepatocytes in Serum-free Medium

我々はニワトリ肝細胞の初代培養法について,炭酸ガスインキュベーターを使用せずに通常の空気インキュベーターを用いる簡便な方法を確立した。これは肝細胞を通常のコラゲナーゼ潅流法で調製し,通常の空気インキュベーター中で,30mM Hepes-NaOHでpH7.8に調整した5%血清(ニワトリあるいは仔牛血清)-L-15培地を用いて蒔込み,3時間後に無血清培地に交換して長期間培養するものである。ニワトリ肝細胞はこの弱アルカリ性の無血清培地で接着•伸展し,10日間程度容易に維持できた。このような条件で培養した肝細胞は肝特異的機能の1つであるアルブミン合成能を,特に培養後期(8日目以降)に強く発現することが確認され,肝特異的機能の1つであるアルブミン生合成能を発現している肝細胞実験系として有用であることが示された。