TGF-β1诱导人胃腺癌SGC-7901细胞建立EMT模型

目的 拟利用TGF-β1诱导人胃癌SGC-7901细胞发生上皮间质转化（EMT）,建立EMT模型.方法 不同浓度TGF-β1作用SGC-7901细胞24h,观察其形态变化,并采用CCK8、迁移试验、细胞侵袭试验和蛋白印迹等技术,检测TGF-β1对SGC-7901细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响.结果 经10ng/ml TGF-β1诱导24h后,多数细胞变为梭型细胞边界基本消失,细胞间间隙明显增大.采用CCK-8试验检测不同浓度（0、5、10、20ng/ml）的TGF-β1对SGC-7901细胞作用24h后OD值,结果显示各作用浓度对SGC-7901的生长抑制率未发现有增加或减少趋势.体外划痕试验检测细胞迁移能力实验中,各组间距为94.67±3.06、87.00 ±3.61、68.67±7.77和91.00±3.00（单位：像素）,10ng/ml剂量组有大量细胞迁移至划痕区,划痕间距明显变小（P＜0.05）.Transwell小室侵袭实验结果：0、5、10、20ng/ml组,侵袭的细胞数分别为152.00±5.29、169.00±6.00、299.33±10.50和176.00±11.27,且l0ng/ml剂量组细胞数明显增多（P＜0.05）.蛋白免疫印迹定量分析显示：不同浓度（0、5、10、20ng/ml）的TGF-β1作用SGC-7901细胞24h,E-cadherin蛋白灰度值测量结果：0、5、10、20ng/ml组,分别为0.95 ±0.02、0.91±0.04、0.62±0.05和0.75±0.32,10ng/ml剂量组灰度值明显减少（P＜0.05）;Vimentin蛋白灰度值测量结果：0、5、10、20ng/ml组,分别为1.18±0.03、1.33±0.02、1.57±0.05和1.19±0.07,10ng/ml剂量组灰度值明显增加（P＜0.05）.结论 10ng/ml TGF-β1诱导人胃腺癌SGC-7901细胞24h后,细胞明显发生EMT过程,本研究证明在人胃腺癌SGC-7901细胞系,通过10ng/ml TGF-β1的诱导24h可以成功建立EMT模型.