苹果蠹蛾颗粒体病毒（CpGV）GP37蛋白在Bac—to—Bac系统中的表达和亚细胞定位

苹果蠹蛾颗粒体病毒（Cydia pomonella granulovirus, CpGV）是防治苹果蠹蛾最重要的生物药剂之一，为探寻苹果CpGV GP37蛋白的增效机制，本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统，将苹果CpGV gp37基因和绿色荧光蛋白基因（egfp）以N端或C端融合的方式插入苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒（Autographa californica multiple nucleocapsid NPV, AcMNPV）基因组中，获得重组的杆状病毒质粒（bacmid），转染昆虫细胞Sf9，然后进行Western blot检测。结果显示，检测到GP37和EGFP的融合蛋白（vAc^EGFPGP37、vAc^GP37EGFP）和非融合蛋白（vAc^GP37、vAc^EGFP）都得到了高效表达；用激光共聚焦显微镜观察蛋白的亚细胞定位情况，融合GP37的EGFP主要聚集在细胞质中，没有融合GP37的EGFP遍布整个细胞，说明CpGV GP37蛋白定位于细胞质中。本实验研究了CpGV GP37蛋白的真核表达，为该蛋白的后续研究提供了条件；而该蛋白的亚细胞定位研究，不仅为CpGV GP37蛋白增效机制的研究提供了基础资料，同时丰富了杆状病毒GP37蛋白的相关理论。