利用番茄果实特异启动子E8改造‘外源基因清除’的表达载体及转化金柑研究

利用“外源基因清除”技术(‘Gene-Deletor’)，将外源基因从转基因金柑果实中彻底清除，达到用转基因作物生产出非转基因食品的目的。本研究利用引物pE8F和pE8R从樱桃番茄中克隆果实特异启动子E8，通过Sal I和Sma I双酶切置换掉“外源基因清除”载体(pCambia-LF-polseed-FLP, 简称: Y-A)中的花粉、种子特异启动子 PAB5 ，重新构造“外源基因清除”载体Y-A-E8，利用农杆菌 EHA105 介导转化实生态金柑，获得转化植株，并通过 nptⅡ 基因特异引物 nptⅡ-F 和 nptⅡ- R PCR检测阳性转化植株。载体Y-A-E8 Sal I和 Sma I双酶切结果表明，E8启动子成功替换启动子 PAB5 ，Y-A-E8经 EHA105 介导转化成功获得11株转化植株且PCR检测到6株为Y-A-E8转基因植株，研究结果可为“外源基因清除”技术在转基因金柑方面的应用提供参考。