Estabelecimento de sistema bacteriano de expressão de peptídeos derivados da enzima vegetal RuBisCO

Resumo O objetivo do presente estudo foi estabelecer um sistema bacteriano de expressao de peptideos derivados da proteolise simulada in silico da enzima ribulose-1,5-bisfosfato carboxilase oxigenase (RuBisCO), proveniente de soja, visando viabilizar um metodo sustentavel de producao dessas moleculas para futura aplicacao industrial. Inicialmente, foi conferida a cepa Escherichia coli S17-1 calcio-competencia para propagacao do plasmideo de expressao pET-30a(+) contendo o inserto codificante da sequencia peptidica GSIKAFKEATKVDKVVVLWTALVPR. Apos extracao de DNA plasmidial, o material foi transformado em celulas de alto rendimento E. coli Rosetta™(DE3)pLysS. As celulas Rosetta portando o plasmideo de expressao foram induzidas e a producao dos peptideos foi verificada por meio de eletroforese em gel vertical, confirmando o estabelecimento de um sistema de expressao viavel para peptideos heterologos. Assim, a producao em maior escala de peptideos derivados de RuBisCO – associando-se futuramente etapas de purificacao e ativacao – torna-se possivel. Alem disso, o metodo aqui estabelecido pode tambem ser aplicado utilizando diferentes sequencias peptidicas com atividade antimicrobiana.