Cultivo de las células estromales de la médula ósea en un medio suplementado con los nutrientes N2: implicaciones sobre la generación de células neurales

Introduccion. La mayoria de los sistemas de cultivo para el mantenimiento in vitro y la diferenciacion neural de las celulas estromales de la medula osea (CEM) utilizan medios sinteticos suplementados con suero fetal bovino (SFB) al 10 o al 20%. Sin embargo, el suero se compone de cantidades desconocidas de sustancias no definidas que podrian interferir el efecto de las sustancias exogenas sobre la diferenciacion neural de estas celulas. Objetivo. En este trabajo describimos la supervivencia de las CEM en condiciones de cultivo donde se redujo la concentracion del SFB al 0,5 y al 1% y se utilizo la formula N2 de Bottenstein y Sato (1979) y un sustrato tratado con poli-L-lisina (PLL). Materiales y metodos. Se cultivaron celulas estromales aisladas de los femures de rata en el medio de Eagle modificado por Dulbecco, con concentraciones de SFB del 10, el 1 y el 0,5% o en medio libre de suero, que contenian la formula N2. En los cultivos crecidos en medios libres de suero o con baja concentracion de este, la superficie de cultivo se trato con PLL. La supervivencia celular se midio por el metodo del MTT o por recuento de las celulas vivas. Resultados. La supervivencia de las CEM cultivadas en la formula N2 disminuyo hasta aproximadamente el 40% de la observada en el medio con SFB al 10%, y se afecto la morfologia celular. Un aumento significativo de la supervivencia con respecto al cultivo en N2 se produjo cuando, ademas de este nutriente, se anadio SFB al 0,5 y al 1%. En los cultivos sembrados sobre superficies tratadas con PLL la supervivencia celular aumento en comparacion con los sembrados sobre superficies no tratadas. Conclusiones. Este sistema de cultivo que combina la formula N2 con SFB al 1% y emplea un sustrato tratado con PLL, es adecuado para el mantenimiento de las CEM. Estas condiciones son ventajosas para estudiar la diferenciacion neural de estas celulas, ya que reducen la interferencia del suero. Se discute la posible implicacion de este sistema de cultivo para los estudios de diferenciacion neural en estas celulas.