P168 Régulation par l’AMPc des interactions entre les protéines SNAREs et le cytosquelette d’actine dans la cellule bêta pancréatique

Introduction A l'heure actuelle, nos connaissances sur le couplage des deux partenaires des etapes distales de l'exocytose dans la cellule beta pancreatique, les proteines SNAREs et le reseau sous-cortical d'actine, restent tres incompletes. Un travail precedent du laboratoire a montre qu'il existait une dynamique des interactions entre les proteines SNAREs et les filaments d'actine sous-corticaux en reponse au glucose, correlee a une reponse insulinosecretoire. Afin de poursuivre dans la comprehension des mecanismes regulant ces interactions, nous avons etudie l'influence d'une modulation de l'AMPc intracellulaire sur la dynamique des interactions SNAREs/actine dans la cellule beta pancreatique. Materiels et methodes Des cellules beta de la lignee INS-1 ont ete cultivees puis mises en presence de modulateurs de l'AMPc intracellulaire pendant differents temps : GLP-1 (100nM), Forskoline (10 ∝m), IBMX (25 ∝m) en presence ou non de glucose. A la fin de l'incubation, la quantite d'insuline secretee a ete dosee par RIA et les extraits proteiques de ces cellules ont ete immunoprecipites afin de reveler les interactions SNAREs/actine. Resultats Nos resultats montrent que le GLP-1 en presence de 20mM de glucose entraine une rupture des associations entre les proteines SNAREs et le reseau sous-cortical d'actine. Cette rupture transitoire est correlee avec l'effet potentialisateur du GLP-1 sur la secretion d'insuline par les cellules INS-1 en reponse au glucose. L'effet du GLP-1 passe bien par une modulation des voies dependantes de l'AMPc puisque l'augmentation artificielle de la concentration de ce second messager intracellulaire par la forskoline ou l'IBMX entraine le meme effet, a savoir une rupture transitoire des interactions SNAREs/actine, accompagnee d'une augmentation de la secretion d'insuline en reponse au glucose. Conclusion Nos resultats suggerent donc une influence de l'AMPc intracellulaire sur les interactions SNAREs/actine dans la cellule beta pancreatique et par consequence, confirment une action de l'AMPc sur les etapes distales de l'exocytose des granules d'insuline.