AAl2（LG21）可溶性表达研究及抗体制备

用PCR技术从AA22基因上扩增出LG21(100—498bp)片段，并克隆到原核表达载体pET—28a(+)上；转化大肠杆菌B121(DE3)，进行诱导表达研究，使其在大肠杆菌中能够可溶性表达，优化表达条件获得表达量比较高的LG21蛋白；用镍离子螯和柱(Ni—NTA)纯化LG21蛋白，获得纯度较高的蛋白。用纯蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体，ELISA结果显示效价可达到1：163 840；Westem结果表明该抗体可以与LG21蛋白特异结合；为进行免疫共沉淀实验，验证Chkl蛋白与AAl2蛋白在体内的相互作用奠定了基础。