Erweiterung des Agar-Overlay-Tests; Untersuchung zur Auswirkung kieferorthopädischer Kunststoffe auf die Proliferation und Differenzierung primärer und transformierter Fibroblasten

In der Kieferorthopadie werden zur Herstellung herausnehmbarer Gerate hauptsachlich Kunststoffe auf der Basis von Methylmethacrylaten verwendet. Durch die Restmonomerabgabe besteht dabei die Gefahr einer toxinbedingten Schadigung von Zellen des Umgebungsgewebes. Ziel der vorliegenden Arbeit war es, durch Erweiterung des klassischen Agar-Overlay-Tests histochemische Verfahren zum Nachweis von Zellschadigungen zu prufen sowie durch den Vergleich konventionell eingesetzter transformierter Mausfibroblasten (L-929) mit primaren humanen Gingivafibroblasten den Toxizitatsbegriff naher zu charakterisieren. Untersuchungskriterien waren die Zellproliferation, welche durch die Inkorporation des Basenanalogons Bromdesoxyuridin analysiert wurde, und die Zelldifferenzierung durch den Nachweis des fibroblastenspezifischen Intermediarfilaments Vimentin. So konnte nach Einwirken der getesteten Monomere unabhangig vom Zelltyp fluoreszenzoptisch eine hemmhofubergreifende Verminderung der Proliferation beobachtet werden. Demgegenuber waren noch einzelne mitotisch aktive Zellen im Zentrum des Hemmhofes sichtbar, die mit Neutralrot nicht immer zweifelsfrei anfarbbar waren. Der Nachweis des differenzierungsspezifischen Intermediarfilaments Vimentin war grosenordnungsmasig mit dem Entfarbungsgrad des klassischen Agar-Overlay-Tests nach Neutralrot-Gabe vergleichbar. Die Untersuchungen ergaben ferner, das unter dem Einflus der Monomere die Hemmhofe bei primaren Gingivafibroblasten deutlich kleiner waren (etwa ein Drittel) als bei der konventionell eingesetzten Mausfibroblasten-Zellinie. Die Befunde zeigen, das der modifizierte Test mit der klassischen Vorgehensweise vergleichbar ist. Durch histochemische Untersuchungen charakteristischer Zelleigenschaften kann daruber hinaus die Bewertung der Neutralrot-Vitalfarbung bezuglich einer toxischen Materialeinwirkung erganzt werden.