Normalización de un método inmunoquímico para detectar papilomavirus humano tipo 16 en lesiones cérvico-uterinas

Introduccion: la infeccion por Papilomavirus Humano (PVH) es la condicion necesaria para la aparicion y desarrollo del cancer cervico-uterino. Los genotipos de alto riesgo oncogenico son los causantes de este tipo de neoplasia y dentro de ellos el mas frecuente es el PVH 16, que se encuentra aproximadamente en el 60 % de los casos. Los metodos de diagnostico comerciales resultan costosos para paises con escasos recursos economicos, lo que sugiere la busqueda de alternativas empleando protocolos sencillos y baratos. Objetivos: normalizar un metodo inmunoquimico para la deteccion del antigeno L1 de PVH tipo 16 en muestras cervico-uterinas de pacientes con lesiones intraepiteliales escamosas y determinar la coincidencia entre el metodo normalizado y la Reaccion en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real (RCP-TR), como tecnica de referencia, para estimar la utilidad de dicho metodo en el diagnostico de la infeccion por este genotipo viral. Metodos: se compararon tres procedimientos de inmunotincion (Indirecto de inmunoperoxidasa en dos pasos, Estreptavidina-Biotina y Amplificacion por polimero) respecto a sensibilidad analitica, tincion inespecifica de fondo y tiempo de terminacion, para la deteccion de la proteina L1 de PVH 16 en lineas celulares derivadas de carcinomas cervicales humanos y en muestras cervico-uterinas utilizadas como controles. El protocolo normalizado se aplico a muestras cervico-uterinas de mujeres entre 30 y 59 anos, 82 con lesiones intraepiteliales cervicales y 10 sin antecedentes de alteraciones citologicas, a las que ademas se les determino PVH 16 mediante RCP-TR. Resultados: el procedimiento de Estreptavidina-Biotina resulto el mas sensible y especifico. La coincidencia entre el metodo inmunoquimico y la RCP-TR fue de un 98,6 %, la sensibilidad fue de un 98,57 % y la especificidad de un 91,67 %, con valores predictivos negativo y positivo por encima del 90 %. Conclusiones: se demostro la validez del metodo inmunoquimico como prueba confirmatoria de la infeccion por PVH 16. Dicho metodo probo ser sensible, sencillo y no requiere de una compleja infraestructura para detectar PVH 16 en muestras cervicales. Ademas, esta tecnica permite obtener informacion rapidamente y evita el uso de metodos invasivos.