Implicación en apoptosis de rutas de transducción de tnf-a y significado clínico de iaps y caspasas en cáncer de prostáta

TNF-? podria influenciar el crecimiento y la evolucion del los tumores prostaticos debido a su capacidad de activar rutas de transduccion implicadas en apoptosis, como la via apoptotica extrinseca y las rutas de transduccion de MAPKs y NF-?B. Por otro lado, IAPs y caspasas son proteinas que desempenan, respectivamente, un papel fundamental en la inhibicion y la induccion de apoptosis. Alteraciones en los niveles de dichas proteinas podrian influenciar el comportamiento del tumor y, en consecuencia, la evolucion del paciente. Por un lado se estudio el efecto de TNF-? sobre el crecimiento y la apoptosis de las celulas cancerosas prostaticas LNCaP (sensibles a los androgenos) y PC3 (independientes de androgenos), asi como el papel que desempenan las rutas de MAPKs y NF-?B en dichos procesos. Se observo una reduccion del crecimiento de ambas lineas celulares con el tratamiento con TNF-?, mas acusado en las celulas LNCaP. Asi mismo, el tratamiento con TNF-? provoco apoptosis en las celulas LNCaP pero no en las celulas PC3. En la linea celular LNCaP la inhibicion de p38-MAPK, JNK, MEK e IKK-s potencio el efecto de TNF-? sobre el crecimiento y la apoptosis. En la linea celular PC3, pese a que la inhibicion de p38-MAPK, JNK, MEK e IKK-s potencio el efecto de TNF-? sobre el crecimiento, unicamente el inhibidor de IKK-s indujo apoptosis en combinacion con TNF-?. Los experimentos de Western blot y citometria de flujo, utilizando inhibidores de IKK-s y NF-?B, indicaron que en la linea celular LNCaP el efecto protector de IKK-s frente a la apoptosis inducida por TNF-? es ejercido mediante la ruta canonica de NF-?B. En cambio, en las celulas PC3 dicho efecto estaria mediado por mecanismos independientes de NF-?B. Por tanto, la inhibicion de IKK-s incidiria sobre procesos antiapoptoticos tanto dependientes como independientes de NF-?B, por lo que podria ser una estrategia terapeutica contra el cancer de prostata mas eficaz que la inhibicion selectiva de NF-?B. La inhibicion de MAPKs e IKK-s bajo estimulacion con TNF-? podria ser eficaz como tratamiento contra el cancer de prostata. Por otro lado, mediante IHC nos propusimos determinar posibles alteraciones relacionadas con patologias prostaticas (HBP, PIN y cancer) en la expresion proteica de IAPs (cIAP1/2, cIAP2, NAIP, Survivin, XIAP) y caspasas (procaspasas-8, -3 y -9, caspasas activadas-8 y -3, y caspasa-7). Ademas, se estudio la asociacion entre la expresion tumoral de estas proteinas y caracteristicas clinico-patologicas del cancer de prostata, y se evaluo su potencial pronostico. cIAP2, NAIP, XIAP y Survivin resultaron estar frecuentemente sobreexpresadas en cancer de prostata en comparacion con el epitelio prostatico normal. La expresion de procaspasa-8, caspasa-8 activada, procaspasa-3, caspasa-3 activada y caspasa-7 se hallo frecuentemente reducida en tumores prostaticos. La alteracion en la expresion de estas proteinas en cancer de prostata ocurriria en una etapa temprana del desarrollo de la enfermedad, pues los pacientes con PIN mostraron una tendencia similar. Asi mismo, no es especifica de la malignidad prostatica, ya que se observo tambien en HBP. La correlacion de la expresion tumoral de IAPs y caspasas con caracteristicas clinico-patologicas de cancer de prostata se estimo mediante la prueba de Spearman. Todas las proteinas estudiadas, a excepcion de NAIP y procaspasa-9, se correlacionaron con al menos una caracteristica clinico-patologica. Los pacientes con inmunotincion negativa para XIAP tuvieron tiempos mas cortos de progresion bioquimica que los pacientes con inmunotincion positiva. Asi mismo, los pacientes con inmunotincion negativa para procaspasa-3 y caspasa-3 activada tuvieron tiempos mas cortos y mayor riesgo de progresion bioquimica que los pacientes positivos. XIAP, procaspasa-3 y caspasa-3 activada resultaron tener valor pronostico de forma independiente y complementaria a marcadores clasicos.