PPAR-γ ligand in suppressing radiation induced PAI-1 upregulation

目的 观察大鼠肾小球膜细胞137Cs照后PAI-1基因的表达情况,以及PPAR-γ配体Piogitazone对照射诱导的PAI-1表达的影响.方法10Gyγ线照射±10 mmol/LPioglitazone处理大鼠肾小球膜细胞,用RT-PCR方法证明PPAR-γ基因表达,用Northern blot、Westem blot方法观察PAI-1基因表达,用Gel-shift方法观察AP-1基因的活性变化(由于PAI-1基因启动子区存在AP-1结合位点,加之AP-1介导某些炎性因子的产生且AP-1是照射诱导的早期表达基因之一,因此观察照射在大鼠肾小球膜细胞能否诱导AP-1活性的升高,并进一步观察Pioglitazone对照后AP-1活性的影响).结果RT-PCR方法证明了大鼠肾小球膜细胞表达PPAR-γ基因.10Gy照后Northern blot结果显示:照后24hPAI-1 mRNA的表达增加,不同剂量照后24h PAI-1 mRNA的高表达呈照射剂量依赖性.10 mmol/L Pioglitazone+10Gy照后24h的Northern blot和48 h的Western blot结果表明,Pioglitazone使照射诱导的PAI-1基因高表达在mRNA水平和蛋白水平均明显降低.Gel-shift结果发现放疗后2 h AP-1活性开始升高,4 h最高,加入Pioglitazone后明显被抑制.结论PPAR-γ配体Pioglitazone使照射诱导的肾小球膜细胞PAI-1基因高表达降低,其机制可能是通过降低AP-1活性来调节PAI-1的表达.Pioglitazone可能具有预防或降低放射性肾损伤的作用,这将有待于动物实验的进一步证实。