α1-Antitrypsin: The Effect of Anticoagulants on the Trypsin Inhibitory Capacity, Concentration and Phenotype

Summary: The effects of anticoagulant s on the determination of both trypsin inhibitory capacity and the concentration of a rantitrypsin measured by radial immunodiffusion, and on the o^-antitrypsin phenotype were investigated. These results were compared with those obtained for serum. The following anticoagulants were investigated: sodium citrate; sodium oxalate; buffered citrate; potassium oxalate/sodium fluoride; sodium heparin; and potassium EDTA. It was found that plasmas from all of the anticoagulants, except sodium heparin, resulted in apparently significant decreases of both trypsin inhibitory capacity and concentration of ocrantitrypsin measured by radial immunodiffusion, relative to serum. These decreases were not simply due to dilution by anticoagulant s. Using both acid starch gel electrophoresis followed by immunofixatio n and isoelectric focusing in agarose, no interference was found in the phenotype determination. It is concluded that serum should be used to measure the trypsin inhibitory capacity or the concentration of arantitrypsin by radial immunodiffusion, although plasma is also suitable provided that sodium heparin is used as the anticoagulant. The o^-antitrypsin phenotype can be determined with either serum or any of the plasmas. None of the anticoagulants employed in this study was present in excess. u.\-Antitrypsin: Die Wirkung von gerinnungshemmenden Substanzen auf die Bestimmung von Hemm-Kapazitat, Konzentration und Phanotyp Zusammenfassung: Die Wirkung von gerinnungshemmenden Substanzen auf die Bestimmung der Trypsinhemmenden Kapazitat und die durch radiale Immundiffusion gemessene Konzentration von a^Antitrypsin sowie auf den ai-Antitrypsin-Phanptyp wurde untersucht. Die Ergebnisse wurden mit den fur Serum erhaltenen verglichen. Folgende Substanzen wurden zur Hemmung der Gerinnung eingesetzt: Natriumcitrat, Natriumoxalat, Citratpuffer, Kaliumoxalat/Natriumfluorid, Natriumheparinat und das Kaliumsalz von EDTA. Plasmen, die mit diesen Substanzen — ausgenommen Natriumheparinat — gewonnen worden waren, ergaben auf Serum bezogen offenbar signifikant niedrigere Trypsin-hemmende Kapazitat und niedrigere mit der radialen Immundiffusion bestimmte Konzentrationen von a,-Antitrypsin. Diese Verminderungen waren nicht einfach durch Verdunnung mit den zur Gerinnungshemmung benutzten Substanzen bedingt. Sowohl mit saurer Starkegelelektrophorese und nachfolgender Immunfixation als auch mit isoelektrischer Fokussierung in Agarose wurde keine Storung der Bestimmung des Phanotyps beobachtet. Zur Bestimmung der Trypsin-hemmenden Kapazitat oder zur Bestimmung der arAntitrypsin-Konzentration mit der radialen Immundiffusion sollte also Serum eingesetzt werden, obwohl auch Plasma - voraussgesetzt , es wurde mit Natriumheparinat gewonnen - geeignet ist. Der arAntitrypsin-Phanotyp kann entweder mit Serum oder mit jedem der verschiedenen Plasmen bestimmt werden. Keine der in dieser Studie angewandten gerinnungshemmenden Substanzen war im Uberschus vorhanden.