Cellulases de souches fongiques issues du sol d'un milieu extrême (sol proche de sources thermales). Sélection des souches et étude des caractéristiques des enzymes.

L'activite cellulolytique est recherchee chez des champignons filamenteux microscopiques isoles de sols environnant les sources thermales des regions Guelma (Hammam Debagh) et de Mila (Hammam Grouz-Atmania et Hammam Safsaf-Teleghma). 88 souches fongiques sont isolees, appartenant a six genres differents : Aspergillus, Alternaria, Emericella, Fusarium, Penicillium et Trichoderma. Leur selection (test au papier filtre et le test des plaques a trous), montre que seule la souche J2 possede une activite cellulolytique importante, comparable a celle de la souche T. reesei Rut C-30. Cet isolat appartient a l'espece Trichoderma longibrachiatum Rifai. A 35°C, notre isolat ne montre pas de differences significatives des activites papier filtre et endoglucanase par rapport a T. reesei Rut C-30, mais l'activite β-glucosidase produite par notre isolat est deux fois plus que celle produite par cette derniere. Avec un taux d'ensemencement de 106spores/ml, la souche est en activite maximale. Un bon rendement en enzyme est obtenu avec des spores âgees de 6 jours. La souche D choisie du sous-clonage, est cultivee en fermenteur de 4 litres sur le milieu mineral Mandel Avicel 1%, et produit un maximum d'activite papier filtre 1.88UI/ml, d'activite endoglucanase 11.22UI/ml et d'activite β-glucosidase 0.64UI/ml apres 128 heures, 144 heures et 120 heures d'incubation, respectivement. Les enzymes papier filtre et endoglucanase sont optimalement active a 60°C et 55°C, respectivement. Un pH optimum de 4.0 et 5.0 pour l'activite papier filtre, alors que l'activite endoglucanase a un pH optimum de 4.0. L'activite endoglucanase est thermostable, elle resiste a un traitement thermique pendant 5 heures a 70°C, 80% de son activite originale est maintenue. La demi-vie de l'activite papier filtre est de 3 heures a 60°C. Le substrat CMC ameliore la stabilite thermique de ces enzymes. Ces enzymes sont stables a 50°C pendant 5 heures dans une gamme de pH de 3.0 a 6.0 et 4.0 a 6.0, respectivement. L'EDTA (5 mM), provoque une forte diminution des enzymes, alors que, le β-mercaptoethanol (5 mM) conduit a leur activation. Les cations divalents calcium (Ca2+) et zinc (Zn2+), provoquent une augmentation et une amelioration des activites enzymatiques en presence de l'EDTA. L'extrait enzymatique brut est capable d'hydrolyser les substrats cellulosiques insolubles, cette enzyme peut ainsi etre classee comme un type endo et exo de la cellulase. Par ces caracteristiques, production de l'enzyme, thermostabilite et pH acide, notre souche sauvage Trichoderma longibrachiatum peut etre attractive en industrie pour la production de la cellulase.Mots cles : Moisissures, isolement, ecosystemes extremes, cellulase, thermostabilite.