Actividad in vitro e in vivo del inhibidor de la proteína de la membrana externa A (OmpA) frente a Acinetobacter baumannii sensible y resistente a colistina

Motivacion: El tratamiento ante la infeccion por Acinetobacter baumannii se ha hecho dificil debido al aumento de la tasa de resistencia antibiotica, incluso a colistina que es el ultimo recurso terapeutico (1). Recientemente, se describio que A. baumannii deficiente en el gen ompA presenta mayor sensibilidad a varios antibioticos incluso la colistina (2,3). Por lo tanto, OmpA podria ser una buena diana terapeutica para aumentar la sensibilidad de este patogeno a colistina. El objetivo del estudio es determinar la actividad in vitro de un peptido inhibidor de OmpA (MV5) frente a cepas sensible (Col-S) y resistente (Col-R) a colistina de A. baumannii y evaluar la eficacia terapeutica de MV5 en combinacion con colistina in vivo . Metodos: Se utilizaron 2 cepas de A. baumannii , una Col-S y otra Col-R. Se determino la concentracion minima inhibitoria (CMI) de colistina de estas cepas en presencia y en ausencia de MV5. Se realizaron curvas de crecimiento bajo distintas condiciones de colistina y MV5. Para estudiar el mecanismo de actuacion del MV5, se efectuo la extraccion de proteinas de la membrana externa (OMPs) y se analizo el perfil proteico mediante SDS-PAGE de ambas cepas en presencia y ausencia de MV5. Se realizaron ensayos en modelo experimental murino de sepsis peritoneal por la cepa Col-S, tratados o no con MV5 (10 mg/kg/d) y colistina (10 mg/kg/d) durante 3 dias, determinando la carga bacteriana en bazo y pulmon, la bacteriemia, asi como la supervivencia. Resultados: Se observo una disminucion en la CMI de colistina de ambas cepas en presencia de MV5. Las curvas de crecimiento mostraron una actividad sinergica in vitro de MV5 con colistina, apreciandose un descenso significativo del crecimiento bacteriano en el tratamiento combinado respecto al tratamiento solo con colistina. Al analizar el perfil de OMPs de las cepas Col-S y Col-R se observo la sobrexpresion de la proteina Omp25 cuando ambas cepas se trataron con MV5, indicando un posible mecanismo de resistencia a colistina adicional de A. baumannii . El tratamiento con MV5 en el modelo de sepsis peritoneal murina redujo significativamente la carga bacteriana en bazo y pulmon con respecto al control y el porcentaje de hemocultivo positivo, y hubo una mayor supervivencia. Conclusiones: Nuestros resultados muestran que el MV5 puede actuar en sinergia con colistina in vitro e in vivo , lo que ayudaria a resolver los problemas relacionados con el tratamiento contra A. baumannii resistentes a colistina.