TGF-β1对人输尿管平滑肌细胞增殖和迁移及α-SMA表达的影响

目的探讨外源性转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β_1）对人输尿管平滑肌细胞（USMCs）生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组：1对照组;2TGF-β1组（10μg/L TGF-β1处理）;3TGF-β1拮抗剂组（30μmol/L SB-431542处理）;4TGF-β1＋TGF-β1拮抗剂组（10μg/L TGF-β1＋30μmol/L SB-431542处理）。MTT法检测各组输尿管平滑肌细胞在处理0、24、48、72h的增殖情况;细胞划痕实验检测各组输尿管平滑肌细胞处理24h、48h时的迁移能力;各组细胞处理48h后分别应用RT-qPCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达变化。结果MTT实验显示与对照组相比,TGF-β1处理24h后USMCs增殖率增加（P〈0.05）,处理48h、72h后增殖最明显（P〈0.01）,拮抗剂组细胞生长明显受抑制（P〈0.05或P〈0.01）,TGF-β1联合SB-431542共同处理细胞后其增殖活性与对照组相比无明显差异;细胞划痕实验显示TGF-β1组与对照组相比,各时间点细胞迁移距离明显增加（P〈0.01）,拮抗剂组24h和48h细胞迁移距离与对照组相比明显减小（P〈0.01）,TGF-β1联合拮抗剂处理组迁移距离与对照组相比差异无统计学意义;RT-qPCR和Western blot结果显示：与对照组相比,经TGF-β1处理组α-SMA mRNA和蛋白的表达明显增加（均P〈0.01）,TGF-β1拮抗剂则明显下调α-SMA mRNA和蛋白的表达（P〈0.01）。结论 TGF-β1能够明显上调输尿管平滑肌细胞中α-SMA mRNA和蛋白的表达,并能增强细胞增殖和迁移的生物活性,拮抗TGF-β1信号路径可明显对α-SMA的表达及细胞增殖和迁移产生抑制效应。