柚皮苷对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响

目的：检测骨碎补有效成分柚皮苷对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法：以成骨细胞株MC3T3-E1细胞为体外药效的试验模型（药物组和对照组），通过CCK·8法观察10，1，0．1，0．01，0．001，0．0001umol·L^-1的柚皮苷溶液对MC3T3-E1细胞增殖能力的影响；通过乳酸脱氢酶（LDH）细胞毒性试验观察以上浓度的柚皮苷溶液对细胞毒性能力的影响。通过骨形成蛋白-2（BMP-2），碱性磷酸酶（ALP）活性测定和骨钙素（OC）含量测定观察柚皮苷对MC3T3-E1细胞分化能力的影响；通过Vonkossa钙化染色法观察柚皮苷对MC3T3-E1细胞钙化能力的影响。结果：高浓度的柚皮苷溶液在12h和24h时能促进MC3T3．E1细胞的增殖作用。而低浓度的柚皮苷溶液则无此作用。所测的各个组别细胞毒性百分比都较小，且随着时间的推移（12，24，48h）变化较小。光镜下观察各个时间点细胞的密度和形态也未发生明显的变化。BMP-2细胞免疫化学结果表明，24，48h时柚皮苷浓度10，1，0．1umol·L^-1包浆内棕色着色比对照组明显。ALP检测结果表明48h时，1，0．1umol·L^-1的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性（P〈0．05）。72h时，0．1umol·L^-1的柚皮苷溶液可提高MC3T3细胞的ALP活性（P〈0．05）。OC检测结果表明12d时，10umol·L^-1柚皮苷溶液作用组与对照组相比OC活性明显提高（P〈0．05）。Vonkossa染色钙化面积百分比结果表明3组柚皮苷溶液作用组与对照组相比无明显区别。结论：柚皮苷溶液可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖能力和分化能力。