Correlación y validación de criterios diagnósticos y escala de severidad en la insuficiencia limbar asistida con microscopia confocal

espanolINTRODUCCION La Insuficiencia limbar (IL) es una enfermedad ocular debida a una disminucion critica de las celulas madre limbares encargadas de la renovacion del epitelio corneal y de constituir una barrera entre el epitelio conjuntival, opaco, y el corneal, translucido. Es conocida la relacion entre el epitelio corneal y los nervios del plexo nervioso subbasal de la cornea, existiendo un circuito quimico retroalimentado para su correcto trofismo. La ausencia de epitelio corneal sano y la neovascularizacion de la superficie corneal se relacionan con la ausencia de plexo nervioso corneal de forma reciproca. Se ha relacionado la disminucion de la densidad de nervios del plexo nervioso corneal subbasal o sub-epitelial (Subbasal nerve density, SND) y de la densidad de celulas basales (Basal cell density, BCD) con estadios precoces de IL. HIPOTESIS El analisis de la densidad celular y del plexo nervioso subbasal del epitelio corneal mediante la microscopia confocal ayuda al diagnostico precoz y a clasificar la insuficiencia limbar basandonos en pruebas documentables y de forma no invasiva. MATERIAL Y METODOS En nuestro trabajo, hemos analizado 97 ojos de 49 pacientes, de los cuales, 85 ojos estaban diagnosticados clinicamente de IL y el resto actuaron de control. Se les realizo exploracion oftalmologica completa, incluyendo fotografias de polo anterior, tinciones vitales, escala de Oxford y Van Bijsterveld, test de OSDI y VFQ 25, analisis con Pentacam®, Keratograph 5M® (K5M) y microscopio confocal HRT II con modulo de cornea Rostock®. Se catalogo a cada paciente segun las clasificaciones de Rama, Lopez-Garcia, Deng clinica, Deng confocal y Schwartz. Para el analisis estadistico se ha usado paquete estadistico SPSS 22 y para el tamano muestral el nQuery Advisor Release 7. Para relacionar dos variables cualitativas se realizaron tablas de contingencia y luego, prueba Chi-Cuadrado o bien, los metodos no asintoticos de Montecarlo y prueba Exacta. Para la comparacion de variables numericas entre dos grupos se aplico la prueba parametrica de la t-Student para muestras independientes, o en su defecto la prueba no parametrica U de Mann-Whitney en caso de distribuciones no normales. Para realizar el modelo de regresion logistica en el analisis multivariante se hizo mediante un metodo de introduccion directa de variables no automatizado, midiendo la fiabilidad con el indice de Hosmer-Lemeshow. La concordancia de estadiajes se midio con el indice Kappa. RESULTADOS La SND analizada con microscopia confocal en pacientes con IL fue de 6469 (6295) µm/mm2, inferior a la de nuestros controles sanos (21766 (4970) µm/mm2) y con respecto a cifras de referencia descritas en la literatura (19000 µm/mm2), sendas diferencias de forma estadisticamente significativa (DES, p CONCLUSIONES Aceptamos la hipotesis de que la microscopia confocal es un buen metodo para el estudio, diagnostico y clasificacion de la insuficiencia limbar, mostrando que la presencia del plexo nervioso subbasal corneal, es un factor protector independiente para la neovascularizacion corneal. No aceptamos la hipotesis de que la densidad de celulas basales sea un buen criterio diagnostico para la insuficiencia de limbo. Proponemos una nueva clasificacion de la insuficiencia limbar a la luz de los hallazgos encontrados, anadiendo como factor pronostico a tener en cuenta la presencia (A) del plexo nervioso corneal central o su ausencia (B), ademas de organizar mejor los hallazgos en los distintos estadios. EnglishINTRODUCTION Limbal stem cell deficiency (LSCD) is an eye disease caused by a critical decrease in limbal stem cells responsible for the renewal of the corneal epithelium and form a barrier to the conjunctival epithelium, opaque and vascularized epithelium. It is known the relationship between the corneal epithelium and neural subasal corneal nerve plexus, having a feedback circuit. The lack of healthy corneal epithelium and corneal neovascularization surface relates to the absence of corneal nerve plexus reciprocally. It has been associated with decreased density of the corneal nerve plexus nerves (SND) and basal cell density (BCD) with early stages of IL. HYPOTHESIS Analysis of cell density and subasal corneal epithelial nerve plexus using confocal microscopy help to early diagnosis and classify LSCD based on documentable and non-invasive tests. MATERIAL AND METHODS In our work, we have analyzed 97 eyes of 49 patients, of whom 85 eyes were diagnosed clinically and the rest of IL acted as controls. They underwent complete eye examination, including photographs of the anterior pole, vital stains, Oxford and Van Bijsterveld scales, OSDI and VFQ 25 questionnaires, Pentacam® tomography, Keratograph 5M® (K5M) and HRT II confocal microscopy with Rostock® cornea module. We classified these patients through Rama, Lopez-Garcia, Deng clinic, confocal Deng and Schwartz classifications. SPSS 22 was used for statistical analysis and nQuery Advisor Release 7 for sample size. To make the ordered logistic regression model, multivariate analysis was done by a non-automated method of direct introduction of variables, measuring the reliability with Hosmer-Lemeshow index. Agreement of classifications was measured through Cohen's kappa coefficient. RESULTS SND was analyzed with confocal microscopy in patients with IL: 6469 (6295) microns / mm2; lower than our healthy controls, 21766 (4970) microns / mm2) and reference numbers described in the literature,19000 microns/ mm2 (p CONCLUSIONS We accept the hypothesis that confocal microscopy is a good method for the study, diagnosis and classification of LSCD, showing that the presence of corneal nerve plexus subasal is an independent protective factor for corneal neovascularization. We do not accept the hypothesis that basal cell density is a good diagnostic criterion for LSCD. We propose a new classification of LSCD, adding the presence of the central corneal nerve plexus as a protective factor.