Sistemas redox enzimáticos y análisis de antioxidantes análogos del ascorbato en el hongo filamentoso "Phycomyces blakesleeanus"

Los objetivos de este trabajo conllevaban el estudio y caracterizacion de sistemas redox de membrana plasmatica y de la biosintesis de reductantes analogos del ascorbato en el hongo filamentoso Phycomyces blakesleeanus. El trabajo realizado nos llevo a determinar una actividad ferricianuro reductasica de membrana plasmatica, que requiere NADH intracelular y que es la responsable de la reduccion extracelular de ferricianuro por P. blakiesleeanus. Dicha actividad es modulada en respuesta a niveles intracelulares de hierro, probablemente mediante un proceso de activacion o amplificacion, siendo negativamente regulada por hierro y cobre. Esta reductasa parece estar involucrada en la toma de hierro, pudiendo constituir el primer paso en el transporte de hierro a traves de la membrana plasmatica del hongo. La reduccion de ferricianuro extracelular esta acoplada con la liberacion de protones al medio extracelular. Ambos procesos son activados por vitamina K3, pero en ningun caso son estequiometricos. El efecto diferencial del dietilestilbestrol y el dicumarol sobre la liberacion de protones descarta a la ATPasa como responsable de la liberacion de los mismos. Los resultados nos llevan a la conclusion de que la reduccion del ferricianuro por la ferrirreductasa de membrana plasmatica y la liberacion de protones en P.blakesleeanus son procesos diferentes, que aunque acoplados, estan regulados de manera independiente. Ademas, se ha detectado otra actividad redox de membrana plasmatica en P. blakesleeanus que se ha caracterizado como AFR reductasa, probablemente implicada en la estabilizacion extracelular de reductantes tipo ascorbato. Actividades tanto AFR como ferricianuro reductasicas se han detectado y caracterizado en la fraccion soluble de este hongo, diferentes de las caracterizadas en membrana plasmaticas. La ferricianuro reductasa soluble participaria en el metabolismo del hierro intracelular y la AFR reductasa