Impact des mutations aléatoires sur les bêta-lactamases : le paysage adaptatif de la résistance aux bêta-lactamines

L'evolution des enzymes est limitee par l'effet des mutations sur leur activite. Pour elucider les determinants moleculaires de ces effets, nous avons produit et sequence 10. 000 mutants aleatoires de la beta-lactamase TEM-1. Nous avons estime la concentration minimale inhibitrice (CMI) a l'amoxicilline de 990 mutants portant chacun une mutation faux-sens unique. Le type de mutation, l'accessibilite des residus a un solvant et l'incidence prevue des mutations sur la stabilite de la proteine contribuent seules ou en association a expliquer les changements de la CMI des mutants. La modification radicale de la repartition de l'effet des mutations induites par la presence de la mutation stabilisatrice Ml 82T peut etre predite par un modele biophysique simple axe sur la stabilite des proteines, ce qui genere un cadre integre pour etudier les effets des mutations et de leurs interactions epispastiques.