Serodiagnostische Nachweisverfahren boviner Parvoviren

Zusammenfassung Das Isolat 214/72, ein Reprasentant von 27 identischen Isolaten aus 3 latent infizierten Kalbern (7) wurde mittels serologischer Kreuzteste an Kaninchenseren als BPV Typ 1 klassifiziert. Mit dem in Japan beschriebenem Typ 2 (9) stellten wir keine Vergleiche an. Der klassiche SN-Test erwies sich wegen schwieriger Realisation und Reproduktion der angestrebten 100 TCD50 Virusdosis als schlecht anwendbar fur Arbeiten mit BPV. Der SN-Test in einer von uns angewandten Modifikation, welche auf einer Viruseinheit basiert (aus der Adenovirusserologie ubernommen), erbrachte sowohl an Kaninchen- wie an Rinderseren hochtitrige und reproduzierbare Ergebnisse. An Mastkalbern wurden damit, je nach Entnahmemonat der Seren, 70% — 100% Seroreagenten ermittelt. Unterschiedlich zu Literaturmeldungen befanden wir die KBR als sehr geeignetes serologisches Verfahren, unter der Voraussetzung, das Meerschweinchen-Komplement mittels 1% aktivem auf BPV antikorperfreiem Kalberserum supplementiert wurde. Zur Prufung von Kaninchenhyperimmunseren auf BPV erwies sich auch der HI-Test als durchaus brauchbar. Fur seinen in der Literatur bisherigen Hauptverwendungszweck, Querschnittserhebungen Summary Serodiagnostic methods for bovine parvoviruses Isolate 214/72, chosen as representative from 27 identical strains isolated from 3 latently infected calves (7), was classified as BPV type 1 with rabbit antisera by cross-seroneutralization. No comparison was made with BPV type 2 described in Japan. The classical SN-test was seen to be ill suited for BPV-serology, as realization and reproduction of the desired virus dose of 100 TCD50 proved very difficult. On the other hand, the SN-test used in a modification developed by us, based on one virus unit (as adopted from adenovirus serology), yielded high-titered as well as reproducible results both with rabbit and cattle sera. In fattening calves slaughtered when 15–20 weeks old it established 70 to 100% seroreactors, depending on the month of sampling. Contrary to reports in the literature we found that the complement-fixation test was very well suited for use with cattle sera, provided that guinea pig complement was supplemented with 1% of active calf serum free from antibodies against BPV. The hemagglutination-inhibition test (HI) was found to be a suitable serological method for BPV with rabbit antisera. For its main purpose described in the literature, epidemiological screening of cattle sera, however, it proved to be unacceptable. With untreated cattle sera HI-tests did not give reproducible results. None of 4 different pretreatments was able to remove nonspecific inhibitors from cattle sera in a manner which left residual HI-titers in any relationship or accord with SN-titers determined on the same sera. Resume Methodes de diagnostic serologique des Parvovirus bovins L'isolement 214/72, representant de 27 isolements identiques a partir de 3 veaux infectes de facon latente (7), a ete classe comme BPV type 1 au moyen de tests serologiques croises sur des serums de lapins. Il n'a pas ete compare avec le type 2 decrit au Japon (9). Etant donne la difficulte de realisation et de reproduction de l'obtention de la dose virale 100 TCD50, la seroneutralisation s'est revelee difficilement applicable pour des travaux avec BPV. Le test de seroneutralisation que nous avons modifie, base sur une unite virale (prise de la serologie des Adenovirus), a donne des resultats avec des titres eleves et reproductibles aussi bien avec des serums de lapins que de bovins. On a obtenu des reactions serologiques de 70–100% chez des veaux d'engrais selon le moment des prelevements de serums. Contrairement aux donnees de la literature, la reaction de fixation du complement s'est averee tres valable a la condition que le complement de cobaye fut additionne de 1% d'un serum de veau sans anticorps BPV. Le test d'inhibition de l'hemagglutination s'est egalement revele utilisable pour l'examen BPV de serums de lapins hyperimmunises; cette methode decrite dans la litterature jusqu'a maintenant comme technique principale avec des serums bovins nous est apparu dans nos recherches comme inacceptable. Les tests d'inhibition de l'hemagglutination n'apporterent aucun resultat reproductible avec des serums non traites. Aucun des 4 procedes de traitement utilises n'a ecarte les inhibiteurs non specifiques des serums de bovins pour obtenir un titre restant d'inhibition de l'hemagglutination en relation et en concordance avec les resultats de la seroneutralisation. Resumen Procedimiento serodiagnostico para identificar parvovirus bovinos Se clasifico el aislamiento 214/72, un representante de 27 aislamientos identicos de 3 terneros infectados latentes (7), mediante pruebas serologicas cruzadas en sueros sanguineos de conejo, como BPV tipo 1. No le hemos comparado con el tipo 2 descrito en el Japon (9). La prueba SN clasica resulto ser muy mala en su aplicacion para los trabajos con BPV a causa de su dificil realizacion y reproduccion de las 100 TCD50 pretendidas. La prueba SN que utilizamos en una modificacion, la cual se basa en una unidad virosica (tomada de la serologia de los adenovirus), aporto resultados de titulos elevados y reproducibles tanto en sueros sanguineos de conejos como en los de vacunos. En los terneros de engorde se descubrieron con esto, segun el mes en que se tomo el suero, entre el 70% y 100% de serorreaccionantes. De forma contradictoria con las noticias bibliograficas, hallamos la RFC como un procedimiento serologico muy adecuado, bajo la condicion previa de suplementar el complemento de cobaya mediante un 1% de suero sanguineo activo libre de anticuerpos frente a BPV. Para contrastar los sueros hiperinmunes de conejo en cuanto a BPV tambien resulto efectiva la prueba de la HI. Para su fin principal de utilizacion con arreglo a la bibliografia publicada hasta la fecha, encuestas transversales en los sueros sanguineos bovinos, se mostro como inaceptable en nuestros estudios. En los sueros no tratados no aportaron las pruebas de HI resultados reproducibles. Ninguno de los 4 procedimientos empleados eliminaba de los sueros sanguineos vacunos los inhibidores in-especificos de una forma tal que los titulos HI restantes hubieran estado en relacion o concordancia con los resultados de la SN.