Desenvolvimento de ensaio imunométrico para a dosagem sérica da subunidade alfa dos hormônios glicoproteicos

Tendo como base um anticorpo monoclonal e um policlonal, desenvolvemos um ensaio imunofluorometrico para a medida de subunidade alfa no soro. O anticorpo monoclonal contra subunidade alfa, empregado para captura, foi produzido a partir de um camundongo imunizado contr LH e apresenta reatividade cruzada contra as formas integras dos hormonios glicoproteicos. Ja o anticorpo policlonal foi produzido em coelho imunizado com subunidade alfa livre e apresenta baixa reatividade cruzada com os hormonios integros. Para a revelacao da ligacao do policlonal a subunidade capturada pelo monoclonal, empregamos um monoclonal anti-IgG de coelho marcado com europio. O ensaio apresenta reatividade cruzada de 2,8 por cento com hCG, 3,2 por cento com FSH, 6,4 por cento com TSH e 9,4 por cento com LH. A sensibilidade e da ordem de 50 ng/L, com perfil de imprecisao mostrando um erro intraensaio inferior a 10 por cento entre os valores 100 e 20.000 ng/L. O coeficiente de variacao interensaio mostrou-se inferior a 14 por cento dentro da faixa de valores encontrados. A definicao de valores normais foi feita a partir de uma populacao normal de 66 adultos, 33 homens e 33 mulheres na menacme, onde encontramos valores entre 70 e 902 ng/L, com mediana de 236 ng/L. Em 14 mulheres mnenopausadas econtramos valores entre 1.498 e 3.919ng/L. A aplicacao do ensaio em 33 pacientes com diagnostico de tumor hipofisario (11 acromegalicos, 15 prolactinomas, 6 tumores "nao secretores" e 1 tumor produtor de TSH) mostrou valores elevados em 11 pacientes