Cultivo primário do órgão hematopoiético de de moluscos do gênero biomphalaria : caracterização morfológica e funcional das células.

ResumoPela primeira vez conseguiu-se o cultivo primario do orgao hematopoietico de caramujos do genero Biomphalaria.O objetivo geral desse trabalho foi obter cultura primaria de celulas do orgao hematopoietico (APO) de caramujos B. glabrata e B. tenagophila ( linhagens Cabo Frio, suscetivel e Taim resistente ao Schistosoma. Mansoni) e caracteriza-las funcional e morfologicamente. A cultura primaria de tecido hematopoietico de Biomphalaria e original e atraves desta sera possivel obter as celulas hematopoieticas em grandes quantidades e em meio definido. Esta nova metodologia permitira estudar a morfogeneses destas celulas, sua ultraestrutura, composicao e comportamento frente a varios estimulos, inclusive frente a esporocistos.Tres tipos celulares morfologicamente distintos, nomeados de tipo I, II, e,III, cresceram na cultura. As celulas tipo I que predominam na cultura celular,sao arredondadas com nucleo grande para o tamanho do citoplasma. As celulas tipo II possuem relativamente mais citoplasma que o tipo I. A presenca de pseudopodes, tambem foi observada. O ultimo tipo celular, denominado tipo III sao refringentes e com nucleo nao definido e menos abumdante, que as outras. Divisao celular atipica foi observada, com nucleo duplicando sem citocinese.Nas culturas realizadas com Apo de caramujos infectados (apos 24 horas de infeccao) encontramos os mesmos tipos celulares encontrados nas culturas de Apo sem infeccao, ou seja, tipos I, II e III. Nao observamos nada de diferente em relacao as culturas de caramujos nao infectados.Em todos os experimentos em que as celulas da cultura foram colocadas em contato com Zimosan foi observado a dispersao das celulas em direcao a essas particulas.Em contato com LPS,foi observada com 72 horas nas culturas a presenca de um envoltorio celular que se assemelha a uma capsula e celulas tipo III. As celulas de B. tenagophila de Cabo Frio apresentaram uma melhor resposta ao antigeno. Um fato interessante observado em todas as culturas realizadas com caramujos do genero Biomphalaria foi a transformacao das celulas tipo I em celulas tipo III, com 7 dias ou mais. Entretanto, quando as celulas da cultura foram colocadas em contato com SEA ou LPS, as celulas tipo III surgem em 48 ou 72 horas respectivamente.Nao houve alteracoes celulares frente a miracidios, com todas as linhagens testadas. Fato que permite a inferencia que os miracidios, ao contrario dos esporocistos nao estimulamas celulas hemocitarias.As celulas de todas as especies estudadas foram positivas para as lectinasWGA, LPL, PNA. B. glabrata nao teve celulas positivas para Com A, entretanto as duas linhagens de B. tenagophila estudadas apresentaram positividade para esta lectina.Nas celulas de todas as linhagens estudadas foi possivel a marcacao de lisossomos.