mda-7／IL24腺病毒对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的抑制作用研究

目的 构建mda-7／IL-24腺病毒，检测其对小细胞肺癌NCI-H446细胞增殖的影响。方法 将mda-7／IL-24cDNA亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中，在大肠杆菌BJ5183中将重组病毒穿梭质粒和骨架质粒重组。在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增，用PCR方法鉴定后，通过，TCID50法测定病毒滴度。用滴度为50pfu／细胞的重组腺病毒Ad．mda-7／IL-24感染NCI-H446细胞72h后，经MTT实验检测其对细胞增殖的影响，并用Westem blot方法检测mda-7／IL-24在NCI-446中的表达。结果 核酸序列测定和PCR鉴定表明成功构建Ad．mda-7／IL-24；TCID50法测定扩增的腺病毒滴度为2×10^30 pfu／ml。Ad．mda-7／IL-24在NCI-H446细胞中表达MDA-7／IL-24，MTT检测表明Admda-7／IL-24明显抑制NCI-H446细胞生长，抑制率为21．37％。结论 重组腺病毒Admda-7／IL-24能显著抑制NCI-H446细胞增殖，为研究mda-7／IL-24的作用机制及将其用于小细胞肺癌的基因治疗提供了条件。